Cultivo in vitro de embriones de lenteja (Lens culinaris Medik.) para aceleración de generaciones

BERMEJO, CAROLINA; CATTANEO, ROMINA MAGALI; COINTRY, ENRIQUE LUIS

Goiânia

Congreso; 8º Congreso Brasilero de Mejoramiento de Plantas (CBMP). O melhoramento de plantas, o futuro da agricultura e a soberania nacional; 2015

La lenteja es una especie diploide, autógama, perteneciente a la familia Leguminosae. Su granoes importante en la dieta humana siendo una fuente rica en proteína, carbohidratos, mineralesesenciales. En los programas de mejora se pretende obtener nuevas variedades con altorendimiento y calidad de semillas sin embargo esto implica un período prolongado de 8-10 años.Para incrementar la eficiencia de los métodos tradicionales resulta imprescindible utilizarmétodos no convencionales. Se demostró que la técnica de cultivo de embriones in vitro reducesignificativamente la duración de los ciclos de generación en legumbres. El objetivo del trabajoconsistió en determinar el momento óptimo de extracción de embriones inmaduros de lenteja y elmedio de cultivo más eficiente para el desarrollo completo de los mismos con la finalidad deacortar los ciclos de generaciones y acelerar el proceso de mejora. Para ello se estudió el efectode genotipos, días desde la fecundación hasta la extracción del embrión y concentraciónhormonal sobre la frecuencia de regeneración de tallos y raíces. Se utilizaron como materialvegetal 4 RILs de nuestro programa de mejora, 2 de tipo macrosperma y 2 microsperma. Sesembraron 25 semillas maduras por genotipo en macetas conteniendo turba y perlita,manteniéndose en invernáculo hasta la extracción de vainas. Como explanto se usaron semillasinmaduras provenientes de la autofecundación de cada uno de los genotipos, se extrajeron a los15, 18, 21, y 24 días luego de la polinización y se cultivaron en medio MS (Murashige y Skoog)al 1% de sacarosa y 0.6% de agar conteniendo 0.175 mg/l de ácido indol-3-acético y 0, 0.025,0.05, 0.1, 0.25 mg/l de 6-Benzilaminopurina. Se mantuvieron en estos medios por 7 días, fueronliberados de los tegumentos ovulares para acelerar la germinación y cultivados en medio frescode la misma composición. Se sembraron 20 explantos por tratamiento y el experimento se repitió2 veces siguiendo un DBCA. Se realizó un análisis de variancia y las medias fueron comparadasmediante la prueba LSD de Fisher (P≤0.05) con el programa Info-Gen. Los genotipos, edad delembrión y su interacción mostraron efectos significativos sobre el porcentaje de regeneración detallos y raíces. Los genotipos microspermas presentaron mayores porcentajes de regeneración detallos (> 80%) y raíces (>70%). La eficiencia del cultivo in vitro incrementó con la edad delembrión. Además el enraizamiento estuvo influenciado por los medios de cultivo y suinteracción con la edad del embrión. Los mayores porcentajes de enraizamiento se obtuvieron enel medio MS sin hormonas con embriones de 21 días alcanzándose también valores altos,superiores al 40%, con embriones de 15 días. Esta metodología podría ser aplicada para acortarlos ciclos de mejora en lenteja y rescate de embriones de híbridos interespecíficos.