LA FOTOACTIVACIÓN DE TETRAACE- TATO DE RIBOFLAVINA GENERA ESPECIES REACTIVAS INDUCIENDO APOPTOSIS EN CÉLULAS TUMORALES CON PARTICIPACIÓN DE LA VÍA MAPK-ERK1/2.

JUAREZ, V; SOSA L DEL V.; COSTA A P; LEAL, R; TORRES, A I; PONS, P

Mar del Plata

Congreso; LX Reunión Anual de la Sociedad Argentina de Investigación Clínica, Mar del Plata-Noviembre de 2015.; 2015

Sociedad Argentina de Investigacion Clinica

cutáneo no melanoma, basado en la combinación de unfotosensibilizador (FS), oxígeno y luz. Sin embargo, el desarrollo deefectivos FS es un tema de gran interés en la actualidad. Nospropusimos estudiar la efectividad de tetraacetato de riboflavina (RTA)en TFD en células humanas de carcinoma escamoso (SCC-13),evaluando el efecto de especies reactivas (ER) generadas por sufotoactivación y las vías de señalización involucradas en el mecanismode muerte celular. Células SCC-13 fueron incubadas con RTA(50μM/3h) e irradiadas (9J/cm2, λ446nm). Para analizar el mecanismode muerte desencadenado por TFD se determinaron diferentesparámetros tales como: expresión de diferentes proteínas porinmunofluorescencia y WB; generación de ER con 2,7-dihidrodiclorofluoresceína por citometría de flujo; análisis de la respiraciónmitocondrial en oxígrafo de alta resolución; contenido de glutatiónreducido por tioles totales no proteicos (NPSH); producción de .O2- condihidroetidio y potencial de membrana mitocondrial con JC-1 porespectrofluorometría. Estadística: ANOVA de dos vías. Luego de laTFD-RTA, se observó expresión de citocromo c en citoplasma,disminución en la expresión de pro-caspasa 3 y Bcl2 y aumento deERK1/2 fosforilada. Sin embargo, la terapia no indujo cambios deexpresión de la proteína pro-apoptótica Bax ni de p-p38. La TFD-RTAgeneró altos niveles de ER, aumento de .O2-, sin variación en elpotencial de membrana mitocondrial. Además, se detectó unincremento en los niveles de NPSH, lo que podría ser un mecanismode defensa antioxidante generado por las células para contrarrestar eldaño oxidativo. En conjunto, estos resultados permiten inferir que lageneración de ER por la aplicación de RTA-TFD, serían activadoresde la vía intrínseca de muerte apoptótica con participación deMAPK/ERK1/2 en células SCC-13, indicando que el RTA sería unefectivo fotosensibilizador en la aplicación de TFD.