El efecto anti-mitogénico del TGF-b1 en células adenohipofisarias tumorales es potenciado por inhibidores de las vías PI3K/Akt y MEK/ERK1/2.

PETITI, JP; SABATINO M E; GUTIÉRREZ, S; SOSA LDEL, V.; VACA, AM; DE PAUL, A L; TORRES, A I

Congreso; Reunión Anual de la Sociedad Argentina de Investigación Clínica (SAIC; 2011

TGF-b1 es un supresor tumoral y la pérdida genética o epigenética de su señalización induciría la formación y progresión de  tumores. Uno de los mecanismos por el cual TGF-b1 actúa como inhibidor de la proliferación es induciendo el arresto del ciclo celular en la fase G1. TGF-b1 ejerce su acción a través de la activación de Smads, aunque existen evidencias que involucran otras vías de señalización. Nuestro objetivo fue determinar la contribución de PKCs, la vía PI3K/Akt y MEK/ERK1/2 como modulares de la respuesta anti-proliferativa inducida por TGF-b1 en células adenohipofisarias tumorales. Cultivos de células GH3B6 se trataron con TGF-b1 (4ng/ml, 24h) sólo o con una pre-incubación de 30 min con los inhibidores: LY294002 (PI3K 10uM) y PD98059 (MEK1/2; 50uM). Se analizó el ciclo celular por citometría de flujo y la expresión de p-Smad2/3, PKCa, p-Akt y p-ERK1/2 por WB. La translocación subcelular de p-Smad2/3 y PKCa se observó por microscopía confocal. Estadística: ANOVA-Fisher. El tratamiento con TGF-b1 indujo un aumento de células en fase G0/G1 (p<0.05), efecto que fue potenciado por  los inhibidores de PI3K y MEK1/2 (p<0.05). En forma paralela TGF-b1 indujo fosforilación de Smad2/3 la cual se incrementó luego del pre-tratamiento con LY294002 y PD98059. Por el contrario, TGF-b1 disminuyó la expresión de PKCa y la fosforilación de ERK1/2, previamente relacionadas con la inducción del ciclo de células GH3B6.  La microscopía confocal reveló translocación de Smad2/3 desde el citosol al núcleo y una redistribución de PKCa desde el citosol a la membrana plasmática luego del tratamiento con TGF-b1. Estos resultados demuestran que el efecto anti-mitogénico del TGF-b1 en células adenohipofisarias tumorales es mediado por la activación de Smad2/3 y potenciado por la inhibición de las vías PI3K/Akt y PKCa/MEK/ERK1/2. La identificación de mediadores intracelulares no clásicos que participan en el efecto inhibitorio de TGF-b1 permitiría postular nuevos blancos terapéuticos.