“Participación de los receptores estrogénicos de membrana en los efectos antimitogénicos del estradiol sobre las células lactotropas”

S GUTIÉRREZ; AL DE PAUL; JP PETITI; LV SOSA; CM PALMERI; M SOAJE; EM ORGNERO; AI TORRES

Mar del Plata, Argentina

Congreso; LII Reunión Anual de la Sociedad Argentina de Investigación Clínica (SAIC); 2007

En trabajos previos hemos demostrado efectos antagónicos del estradiol (E2) en interacción con factores de crecimiento sobre la proliferación de células lactotropas, desconociéndose la participación de los receptores estrogénicos (RE) de membrana en estas acciones. Nuestro objetivo fue investigar los efectos de la interacción E2/Insulina (Ins), evaluar la participación de RE de membrana y de PKCε, ERK1/2, y Pit-1 en estas acciones e identificar RE en la membrana plasmática de lactotropas. Cultivos primarios adenohipofisarios de rata hembra fueron tratados con E2 o E2–BSA (forma impermeable a la membrana) (1 nM) solos o co-incubados con Ins, (100ng/ml) por 15, 30, 60 min y 24 h. Previo a los tratamientos, se agregó un inhibidor de PKC (BIM 1 µM). La proliferación de lactotropas se cuantificó por detección inmunocitoquímica de BrdU/PRL y la secreción de PRL por RIA. La expresión de PKC?, ERK 1/2 fosforilada y total, Pit-1 y ß actina fue determinada por Western Blot. Análisis estadístico ANOVA-Tukey. Los RE de membrana se identificaron por inmunocitoquímica para microscopía electrónica (ICQe). E2–BSA estimuló la secreción de PRL, mostrando un efecto diferencial en relación al E2 libre. Ins incrementó significativamente la actividad mitogénica de las lactotropas. El número de lactotropas no presentó cambios con E2 o E2–BSA. El tratamiento combinado de E2 o Es-BSA con Ins inhibió la proliferación inducida por este factor (p<0.001). La expresión de PKC epsilon, ERK 1/2 fosforilada y Pit-1 fue incrementada tanto con E2–BSA como con Ins, mientras que la co-incubación E2–BSA/Ins redujo su expresión, en correlación con el efecto antimitogénico observado. Mediante ICQe se observó la isoforma RE alfa en la membrana plasmática de las lactotropas. Nuestros resultados evidencian que los RE de membrana, probablemente la isoforma alfa, participan en la modulación de la proliferación de las células lactotropas inducida por el E2 en interacción con Ins, a través de la vía PKCepsilon, ERK 1/2 y Pit-1.