- Participación del receptor estrogénico alfa y de la vía Oxido Nítrico/Guanilato Ciclasa/GMPc en la acción antimitogénica del estradiol en interacción con insulina sobre células lactotropas.

GUTIÉRREZ, S; PETITI, J. P.; SOSA, LV; DE PAUL, A L; MASINI-REPISO, A M; TORRES, A. I.

Congreso; Reunión Anual de la Sociedad Argentina de Investigación Clínica (SAIC).; 2009

Previamente hemos demostrado que el estradiol (E2) inhibe la proliferación de lactotropas inducida por insulina (Ins), desconociéndose la isoforma del receptor de estrógeno (RE) que media este efecto. En base a estos antecedentes nos propusimos evaluar la participación de las isoformas a y b del RE en las acciones del E2 modulando la proliferación de células lactotropas promovida por Ins, así como la contribución de la vía Oxido Nítrico (ON)/Guanilato Ciclasa (GC)/ GMPc en este efecto. Cultivos primarios adenohipofisarios de rata hembra fueron tratados con E2 (1nM) e Ins (1000 ng/ml), solos o combinados por 60 min. Se utilizaron agonistas de los REa (PPT 1 nM) y b (DPN 1nM), inhibidores: de los RE (ICI 182780, 100nM) y de óxido nítrico sintasa, NOS (L-NMMA, 0.1mM y L-NAME, 1mM). Se valoró la proliferación de lactotropas por doble detección inmunocitoquímica de BrdU y prolactina, la expresión de GC a1 y b1 y b-actina por Western Blot y la producción de GMPc por ELISA. Análisis estadístico ANOVA-Fisher. En condiciones libres de suero, E2 ni los agonistas de los RE a o b estimularon la proliferación de lactotropas. La incubación de E2/Ins y PPT/Ins promovieron un efecto antimitogénico sobre las lactotropas (p<0.01 vs Ins). Este efecto fue revertido por ICI 182780 y por L-NMMA y L-NAME (p<0.01). Con respecto a la vía ON/GC, E2 e Ins solos ejercieron efectos opuestos sobre la expresión de las isoformas de GC (incrementaron a1 e inhibieron b1). La co-incubación de E2/Ins y PPT/Ins indujo un aumento significativo de ambas isoformas. E2 e Ins solos disminuyeron la producción de GMPc (44% y 26% vs. control respectivamente), mientras que la co-incubación de E2/Ins incrementó significativamente su producción. Estos resultados sugieren que el E2 a través de la isoforma á del RE inhibe la actividad mitogénica de las células lactotropas inducida por Ins con participación de la vía ON/GC/GMPc.a y b del RE en las acciones del E2 modulando la proliferación de células lactotropas promovida por Ins, así como la contribución de la vía Oxido Nítrico (ON)/Guanilato Ciclasa (GC)/ GMPc en este efecto. Cultivos primarios adenohipofisarios de rata hembra fueron tratados con E2 (1nM) e Ins (1000 ng/ml), solos o combinados por 60 min. Se utilizaron agonistas de los REa (PPT 1 nM) y b (DPN 1nM), inhibidores: de los RE (ICI 182780, 100nM) y de óxido nítrico sintasa, NOS (L-NMMA, 0.1mM y L-NAME, 1mM). Se valoró la proliferación de lactotropas por doble detección inmunocitoquímica de BrdU y prolactina, la expresión de GC a1 y b1 y b-actina por Western Blot y la producción de GMPc por ELISA. Análisis estadístico ANOVA-Fisher. En condiciones libres de suero, E2 ni los agonistas de los RE a o b estimularon la proliferación de lactotropas. La incubación de E2/Ins y PPT/Ins promovieron un efecto antimitogénico sobre las lactotropas (p<0.01 vs Ins). Este efecto fue revertido por ICI 182780 y por L-NMMA y L-NAME (p<0.01). Con respecto a la vía ON/GC, E2 e Ins solos ejercieron efectos opuestos sobre la expresión de las isoformas de GC (incrementaron a1 e inhibieron b1). La co-incubación de E2/Ins y PPT/Ins indujo un aumento significativo de ambas isoformas. E2 e Ins solos disminuyeron la producción de GMPc (44% y 26% vs. control respectivamente), mientras que la co-incubación de E2/Ins incrementó significativamente su producción. Estos resultados sugieren que el E2 a través de la isoforma á del RE inhibe la actividad mitogénica de las células lactotropas inducida por Ins con participación de la vía ON/GC/GMPc.