El estradiol induce rápida translocación del receptor estrogénico á a la membrana plasmática en células adenohipofisarias.

GUTIÉRREZ, S; DE PAUL, A L; PETITI, J. P.; SOSA LDEL, V.; MASCANFRONI, I.; MUKDSI, J. H.; PELLIZAS,C.; TORRES, A I

Congreso; Reunión Anual de la Sociedad Argentina de Investigación Clínica (SAIC).; 2009

El estradiol (E2) ejerce sus efectos a través de sus receptores (RE) a y b, citoplasmáticos/nucleares y de membrana plasmática, siendo el REa el principal mediador en adenohipófisis. Se ha demostrado que variaciones en la localización subcelular de los RE modifica tanto la señalización rápida como la genómica. Teniendo en cuenta estos antecedentes nos propusimos investigar si el E2 induce translocación del pool de RE intracelulares a la membrana plasmática en células adenohipofisarias normales. Cultivos primarios adenohipofisarios de rata hembra se trataron con E2 (10 nM) por 0, 5, 15 y 30min. Se realizó inmunofluorescencia (Microscopia confocal) en células permeabilizadas, para observar la redistribución intracelular del REá y se determinó su expresión en fracciones nuclear, citosólica y de membrana por western blot. Mediante citometría de flujo (CF) (en células sin permeabilizar) y microscopía electrónica (ME), se detectó REá y prolactina en células adenohipofisarias. Análisis estadístico ANOVA-Fisher. Por inmunofluorescencia se localizó REa en núcleo y citosol en células adenohipofisarias controles, mientras que a los 15 min de estímulo estrogénico se observó un incremento notable de la inmunomarcación en membrana plasmática. Estos Resultados se correlacionaron con un aumento significativo de la expresión de REá en la fracción de membrana y una disminución a nivel nuclear y citosólico en este tiempo. Por ME se detectó REá en la membrana plasmática de lactotropas, dato confirmado mediante CF donde un 8% de lactotropas expresaron REá en la superficie celular, sin observar variaciones en los diferentes tiempos. Estos Resultados indican que E2 induciría una rápida translocación del REá intracelular hacia la membrana plasmática. Además sugerirían la presencia de un pool de REá residente en la membrana plasmática de las lactotropas, detectable en la superficie celular e independiente al estímulo estrogénico aplicado.a y b, citoplasmáticos/nucleares y de membrana plasmática, siendo el REa el principal mediador en adenohipófisis. Se ha demostrado que variaciones en la localización subcelular de los RE modifica tanto la señalización rápida como la genómica. Teniendo en cuenta estos antecedentes nos propusimos investigar si el E2 induce translocación del pool de RE intracelulares a la membrana plasmática en células adenohipofisarias normales. Cultivos primarios adenohipofisarios de rata hembra se trataron con E2 (10 nM) por 0, 5, 15 y 30min. Se realizó inmunofluorescencia (Microscopia confocal) en células permeabilizadas, para observar la redistribución intracelular del REá y se determinó su expresión en fracciones nuclear, citosólica y de membrana por western blot. Mediante citometría de flujo (CF) (en células sin permeabilizar) y microscopía electrónica (ME), se detectó REá y prolactina en células adenohipofisarias. Análisis estadístico ANOVA-Fisher. Por inmunofluorescencia se localizó REa en núcleo y citosol en células adenohipofisarias controles, mientras que a los 15 min de estímulo estrogénico se observó un incremento notable de la inmunomarcación en membrana plasmática. Estos Resultados se correlacionaron con un aumento significativo de la expresión de REá en la fracción de membrana y una disminución a nivel nuclear y citosólico en este tiempo. Por ME se detectó REá en la membrana plasmática de lactotropas, dato confirmado mediante CF donde un 8% de lactotropas expresaron REá en la superficie celular, sin observar variaciones en los diferentes tiempos. Estos Resultados indican que E2 induciría una rápida translocación del REá intracelular hacia la membrana plasmática. Además sugerirían la presencia de un pool de REá residente en la membrana plasmática de las lactotropas, detectable en la superficie celular e independiente al estímulo estrogénico aplicado.