EXPRESION DIFERENCIAL DEL RECEPTOR FGFR1 EN PitNET SECRETORES Y NO FUNCIONANTES Y SU ASOCIACION CON LA REGULACIÓN DE LA PROLIFERACIÓN IN VITRO.

SOSA L DEL V.; VILLAFANE E M; TURINA A; ZLOCOWSKI N; GARCIA-BARBERA, F; CECENARO L; CALAFAT P; DE BATISTA J; MUKDSI, J. H.; PETITI J P

Rosario

Congreso; XIV Congreso FASEN; 2022

Federacion Argentina de Sociedades de Endocrinlogia

El progreso y comportamiento de los tumores neuroendocrinos pituitarios (PitNET) está asociado a la participación de numerosas moléculas, lo que sugiere que a menudo se desarrollan a partir de efectos acumulativos, sin embargo, los mecanismos moleculares que impulsan el comportamiento no fueron totalmente caracterizados. Una alteración frecuente es la del Factor de Crecimiento Fibroblástico básico (FGF2) y su receptor FGFR tipo 1 (FGFR1), cuya desregulación ha sido observada en numerosos neoplásicas y estaría involucrada en la regulación de la proliferación celular.El objetivo fue determinar la expresión de FGFR1 en PitNET secretantes y no funcionantes (NF) y su participación en la proliferación en tumores hipofisarios in vitro. La expresión de FGFR1 fue evaluada en PitNET secretantes (GH n=4 y ACTH n=4) y NF (n=16), mediante inmunohistoquímica y la misma fue analizada según los diferentes parámetros clínicos-patológicos. En experimentos in vitro, se utilizaron las líneas celulares de tumor hipofisario somatolactotropas (GH3) y corticotropas (ATt20) que fueron estimuladas con FGF2 (10 y 100 ng/ml). La expresión de FGFR1 se evaluó por western blot (wb). La viabilidad celular se determinó mediante ensayo MTT después del estímulo con FGF2 por 24-48 h en medio con o sin suero al 10%. La respuesta proliferativa se analizó mediante la captación de BrdU durante 24 h y la fosforilación de ERK1/2 mediante wb después del estímulo con FGF2 por 30 min. Además, se utilizó el análogo sosmatostatina, octreotide (OCT, 100 nM), el inhibidor de FGFR1 AZD4745 (0,1-10 µM) y de MEK PD98059 (50 µM). Estadística: test de Kruskal-Wallis y ANOVA-Post-test: Tukey. Los resultados mostraron que el 50% de los PitNET GH y ACTH y el 87,5% de los NF fueron positivos para FGFR1. Además, la expresión de FGFR1 fue significativamente mayor en los PitNET NF vs los secretantes (p=0,036). Mientras que no se observó diferencia significativa respecto al género (p=0,463), a los grupos etarios de 55 años (p=0,147), con el índice de Ki-67 (p=0,223) y respecto al tamaño tumoral (p=0,627). En los estudios in vitro, la expresión de FGFR1 fue mayor en GH3 que en ATt20. FGF2 indujo un aumento significativo de la viabilidad celular en GH3 a las 24 y 48 h en ambas dosis, mientras que en las células ATt20, el aumento de la viabilidad celular (p˂0,05) solo se observó después del estímulo con FGF2 (100 ng/mL) por 48 h. Teniendo en cuenta que el efecto de FGF2 en GH3 fue mayor, continuamos trabajando en esta línea celular. Los niveles de expresión de ERK1/2 fosforilada aumentaron después del estímulo con FGF2 (10 y 100 ng/mL) durante 30 min (p˂0,05 vs control). La viabilidad celular y la captación de BrdU fue significativamente mayor en los cultivos tratados con FGF2 a ambas dosis en presencia de suero al 10%, efecto que se revirtió con la co-incubación con AZD y con PD98059 (p