ROTAVIRUS BOVINO G6 Hun4-like P[11] ASOCIADO A CORONAVIRUS y Cryptosporidium

LOUGE URIARTE, ENRIQUE; BADARACCO, ALEJANDRA; GARAICOECHEA, LORENA; DANIELA RODRIGUEZ; LICOFF, N; MEIJIA, M; MALENA, R; MOREIRA, ANA RITA; PARREÑO, VIVIANA; ODEON, ANSELMO

Mercedes, Corrientes

Jornada; XVIII Reunión Científico técnica AAVDL; 2010

AAVDL

Introducción Rotavirus (RV) y coronavirus (CoV) son los agentes virales que se identifican con mayor frecuencia como causa de diarrea en animales recién nacidos de todo el mundo. RV presenta una cápside externa formada dos proteínas estructurales denominadas VP7 y VP4. La variación genética y antigénica de estos antígenos virales permite establecer un sistema de clasificación binario en G tipos (glicoproteína) y P tipos (sensible a proteasa), respectivamente. Dependiendo de las técnicas empleadas, los G y P tipos pueden denominarse como serotipos o genotipos. A nivel mundial, los genotipos G y P de rotavirus bovino grupo A (RVB-A) que se describen con mayor frecuencia son G6, G8, G10, P[1], P[5] y P[11].  Coronavirus bovino (CoVB) es un virus neumo-entérico de distribución mundial y está implicado en la etiología de la diarrea del ternero, la disentería de invierno en vacas y el complejo respiratorio en bovinos de feedlot. En Argentina se ha evidenciado la circulación de CoVB en terneros con diarrea de tambo y cría, estando presente con una prevalencia de 2,08%. El objetivo del presente trabajo es describir la circulación simultánea de RVB-A, CoVB y Cryptosporidium spp. en un brote de diarrea en terneros de tambo. Materiales y métodos El estudio se realizó en un tambo del partido de Rivadavia, provincia de Buenos Aires. La crianza artificial contaba con 100 terneras en estaca y alimentadas con 4 L de leche y alimento balanceado. Durante un brote de diarrea se decidió recolectar muestras de materia fecal de animales con diarrea (n: 12), con diarrea y tratamiento (rehidratación oral, florfenicol y enrofloxacina + bencetimida) (n: 5) y sin diarrea (n: 2). Las madres habían recibido, en su último tercio de gestación, una vacuna para prevenir la diarrea neonatal cuya formulación incluía rotavirus bovino serotipo 6 y 10 inactivados, emulsionados en adyuvante oleoso. La detección de RVB- A se realizó por ELISA indirecto de captura policlonal y la de CoVB por ELISA indirecto de captura monoclonal. Las muestras positivas a RVB-A se analizaron por RT-PCR semi-anidada múltiple para su genotipificación. Esta técnica permite la detección de los genotipos G (G6 NCDV -linaje IV-, G6 Hun4-like -linaje III-, G8 y G10) y P (P[1], P[5] y P[11]) que son más frecuentes en bovinos de Argentina. Las muestras también fueron sometidas a análisis bacteriológico. Para el aislamiento de Salmonella se formaron 3 pooles de materia fecal. Las muestras se cultivaron en agar MacConkey y XLD (18-24 h a 37 °C). Además, se les realizó un enriquecimiento selectivo en caldo tetrationato y tres repiques en agar XLD a las 24, 72 y 120 h. Los aislamientos de E. coli en agar MacConkey se confirmaron por pruebas bioquímicas de rutina. En 8 extendidos de materia fecal se evaluó la presencia de ooquistes de Cryptosporidium spp. por medio de la tinción de ZN modificada. Resultados De 17 terneras con diarrea se detectaron infecciones simples por RVB-A (3/17; 17,6%), CoVB (1/17; 6%) y co-infecciones por RVB-A + CoVB (2/17; 12%).  En las 2 terneras sin diarrea se detectó RVB-A (2/2; 100%). El genotipo identificado en 5 muestras (5/7; 71,4%) correspondió a G6 Hun4-like (linaje III) P[11] y en las 2 restantes G?P[11]. De las 8 muestras analizadas para Cryptosporidium spp. se detectaron 2 positivas (2/8; 25%), representando una infección simple (1/8; 12,5%) y una co-infección con RVB-A (1/8; 12, 5%). En todas las muestras se aisló E. coli y en ninguna Salmonella. Discusión y conclusiones El brote de diarrea estudiado se caracterizó por ser de etiología mixta, teniendo como agente más frecuente a RVB-A, acompañado de CoVB y Cryptosporidium ssp. En la mayoría de las muestras positivas a RVB-A se detectó el genotipo G6 Hun4-like (linaje III) P[11]. En tambos de Argentina, este genotipo predomina con relación a G10P[11] (23% vs. 11%, respectivamente) y en Holanda se ha identificado en 17.9% de los rodeos analizados. Con respecto a CoVB, es interesante el hallazgo de 3 terneras infectadas, ya que es un virus de muy baja prevalencia en nuestro país (2,08%) y los brotes mixtos con RVB-A sólo alcanzan el 1,2%. La detección de Cryptosporidium spp. es relevante ya que la infección por este protozoo tiene una correlación significativa con la diarrea en terneros; además la enfermedad ha sido reproducida experimentalmente en esta especie. Finalmente, el tratamiento con antibióticos pudo haber afectado el aislamiento de Salmonella spp. en algunas terneras y no se descarta que diferentes patotipos de E. coli (ETEC, STEC y EHEC) hayan estado implicados como causa de la diarrea.