Apoptosis en acinos aislados de glándulas submaxilares de ratones nod: rol de tnf alfa,

CALAFAT, M; LAROCCA, L; ROCA, V; PREGI, N; NESSE, A; DUSETTI, N; PÉREZ LEIRÓS, C

Mar del Plata, Argentina

Congreso; LII Reunión Científica Anual de la Sociedad Argentina de Investigación Clínica; 2007

SAIC

El síndrome de Sjögren es una enfermedad autoinmune caracterizadapor alteraciones histológicas y funcionales de las glándulasexócrinas, se propone que un fallo funcional y/o unaapoptosis inapropiada en glándulas salivales podría iniciar la respuestaautoinmune. En trabajos previos demostramos un aumentoen la apoptosis de glándulas submaxilares y en los niveles deTNF-alfa en suero de los ratones NOD. TNF puede inducir apoptosisen algunos tipos celulares La activación del factor de transcripciónNFkB participa en la vía de señalización de TNFα induciendola expresión de genes blanco pro y anti apototicos. El VIP(péptido intestinal vasoactivo) es un neuropéptido prosecretorioy antiinflamatorio común a los sistemas nervioso e inmune. Nuestroobjetivo fue estudiar la participación de TNF-alfa en laapoptosis temprana de acinos aislados de glándulas submaxilaresde ratones NOD, el rol de NFκB y la posible regulación por VIP.Se emplearon hembras de 16 semanas, la apoptosis se determinópor Hoescht y por expresión de bax y TP 53INP1 (RT-PCR yWestern Blot). Receptor 1 de TNF(rTNF1) por PCR e iNOS porinmunohistoquímica. Observamos que TNF-alfa indujo apoptosisen forma concentración dependiente con un mayor porcentaje a5 ng/ul en acinos NOD vs control BALB/c y mayor expresión debax (unidades arbitrarias de área-UA: X±ES; BASAL 51±4;TNF107±5 p<0.05) y de TP53. En los NOD se observó una activaciónbasal de NFkB con falta de respuesta al TNF (p65 translocada,UA X±ES BALB BASAL 60±4; TNF 126±11*; NOD BASAL129±12*; TNF 120±9; *p<0.05 vs BASAL BALB). En cambio, nose observaron diferencias en la expresión de rTNF1 e iNOS. Eltratamiento con VIP (10-7) inhibe la inducción de bax por TNF (UA:X±ES; TNF 107±5; VIP 51±4; p<0.05) y tp53 sólo en NOD y dertnf1 en ambos. En acinos de ratones NOD con una activaciónbasal de NFkB, TNF induce apoptosis a menor concentración juntocon un incremento de TP53 y bax. VIP inhibe la expresión deestos mediadores.