Efecto del alendronato sobre los procesos celulares involucrados en calcificaciones ateroscleróticas

CUTINI PH, RAUSCHEMBERGER MB, CAMPELO AE, SANDOVAL MJ, MASSHEIMER VL

Buenos Aires

Congreso; XXIX Reunión anual de la AAOMM; 2012

Asociación Argentina de Osteología y Metabolismo Mineral

Los bifosfonatos constituyen uno de los tratamientos eficaces para la osteoporosis. Estudios epidemiológicos han demostrado la relación existente entre osteoporosis, enfermedad cardiovascular, y si bien tradicionalmente estas enfermedades se han considerado procesos independientes, en la actualidad está demostrado que ambas entidades comparten mecanismos fisiopatológicos. Las calcificaciones vasculares son un ejemplo de interacción entre los sistemas óseo y vascular. La calcificación aterosclerótica es un proceso celular activo que  se origina como consecuencia del microambiente inflamatorio que involucra la transdiferenciación de  células vasculares a linaje osteogénico, con una participación activa de células endoteliales (CE), musculares lisas vasculares (CMLV), monocitos y macrófagos. El óxido nítrico (NO) producido por las CE inhibe el proceso de calcificación vascular. En cambio el stress oxidativo, la migración de CMLV, la adhesión de monocitos, la apoptosis son algunos de los eventos que promueven la calcificación. Se ha propuesto que los bifosfonatos (BPs) inhiben la calcificación vascular aunque no está claro aún si actúan en forma directa sobre las células vasculares o indirectamente a través de su acción sobre el sistema óseo. El objetivo del presente trabajo fue investigar la existencia de acciones directas del Alendronato (ALN) sobre las células vasculares regulando los procesos celulares que median las calcificaciones vasculares. Se emplearon cultivos de CE ó de CMLV obtenidos por la técnica de explante a partir de anillos de aorta de rata Wistar hembras, tratados in vitro con diferentes dosis de ALN. Se trabajó en condiciones basales ó de inflamación, empleándose el lipopolisacárido bacteriano (LPS) como agente proinflamatorio. En CE observamos que, 15 minutos de tratamiento con ALN 5µM estimuló significativamente la producción de NO  (28.22 ± 2.9, vs 46.3± 6.01 nmol NO/mg prot, C vs. ALN, p<0.01). Resultados similares se obtuvieron con dosis 10 y 50 µM (38 y 104% s/control, respectivamente). La producción de NO por CMLV es considerada un efecto deletéreo causado por inducción de la isoforma inducible de la oxido nítrico sintasa. En CMLV, 24 hs de tratamiento con ALN (0.1, 1; 2.5, 5, 7.5, 10 µM) inhibió significativamente la producción de NO a todas las dosis ensayadas (47; 54, 48, 49, 56, 37% por debajo del control, respectivamente, p<0.01). En cambio, el LPS estimuló la síntesis muscular de NO (104% s/c, p<0.05). Bajo condiciones inflamatorias (en presencia de LPS) el ALN no modificó el estímulo del LPS. En ensayos de migración celular observamos que ALN no indujo movilidad de  CMLV comparado con la movilidad inducida por norepinefrina (control positivo de migración). Se estudió el efecto de ALN sobre la adhesión de monocitos a CE en cultivo. CE fueron tratadas (24 hs) con diferentes dosis de ALN en presencia y ausencia de LPS y finalizado el tratamiento se adiciona una cantidad exacta de monocitos por 2hs y se cuantifica la adhesión por microscopia óptica. El ALN no indujo adhesión monocítica, el LPS la estimuló en un 65% (p< 0.01). Si las CE se tratan con ALN 5 µM 5 hs previo a la injuria inflamatoria, el ALN revierte parcialmente el efecto de LPS. Los resultados presentados muestran una acción directa del ALN sobre las células vasculares, estimulando los procesos inhibitorios e inhibiendo los activadores de las calcificaciones vasculares, sugiriendo una potencial acción favorable del BF sobre la homeostasis vascular.