VSP recombinante de Giardia lamblia protege a péptidos bioactivos de la digestión proteolítica

MARIANELA C SERRADELL, ROMAN A MARTINO, LUCÍA L RUPIL, MA FLORENCIA GHIBAUDO, HUGO D LUJÁN

rosario

Congreso; XXVI Reunión Científica Anual de la Sociedad Argentina de Protozoología.; 2013

Sociedad Argentina de Protozoología

Giardia es un patógeno intestinal que experimenta variación antigénica, un mecanismo por el cual los trofozoítos cambian continuamente sus principales moléculas de superficie. Estos antígenos de superficie pertenecen a una familia de proteínas integrales de membrana ricas en cisteína denominadas proteínas variables de superficie (VSP), que cubren toda la superficie de los trofozoítos otorgándole protección en tracto gastrointestinal (TGI). Las VSPs presentan características únicas que las convierten en candidatos ideales para el transporte de fármacos a través del TGI: resisten pH ácido, la degradación proteolítica y se adhieren a mucosa intestinal. Para la producción de VSP recombinante, la porción extracelular de las VSPs se generó a través del Sistema de Expresión en Baculovirus y purificación por el sistema de columna de Ni-NTA. Inicialmente se utilizó insulina como una droga prototipo para ser administrada por vía oral. La combinación de insulina con VSP pudo proteger esta molécula de la degradación y promover su acción biológica sistémica. Esto también fue observado con otros péptidos bioactivos. Así, cuando se evaluó el efecto sobre glucagón (Gln), se observó que la combinación con VSP aumentó significativamente la resistencia del Gln a la proteólisis por tripsina y que mediante ensayos in vivo la administración oral de Gln en combinación con VSP, a diferencia de la adminitración de Gln oral solo, permitió su absorción por TGI, aumentando los niveles de glucemia. Hormona de crecimiento humana (hHC) y Hemaglutinina del virus de la Influenza (HA, H5N1) también fueron protegidos de la acción de tripsina al ser mezclados con VSP. Estos resultados muestran que VSPs de Giardia protegen péptidos bioactivos cuando se administran por vía oral. Las características estructurales de las VSPs que le confieren estas propiedades están bajo análisis.