Apoptosis de eosinófilos en fasciolosis experimental: Efecto de los Productos Excretores-Secretores (PES) del parásito.

SERRADELL M., CERVI L., BORGONOVO J., CHIAPELLO L., MASIH D.T.

Córdoba, Argentina

Jornada; IX Jornadas de Bioquímica Clínica-Asociación de Bioquímicos de Córdoba; 2004

Asociación de Bioquímicos de Córdoba

INMUNOMODULACIÓN EN FASCIOLOSIS EXPERIMENTAL: EFECTO  DE  LOS PRODUCTOS EXCRETORES-SECRETORES SOBRE FUNCIONES DE EOSINÓFILOS . Serradell M - Dpto de Bioquímica Clínica, CIBICI, Fac. de Ciencias Químicas, U.N.C, Córdoba, Argentina. OBJETIVO: Uno de los principales objetivos de este plan de trabajo es el estudio del fenómeno de apoptosis en el contexto de la infección por Fasciola hepatica. En esta primera etapa se investigó la ocurrencia de apoptosis "in vivo" en un modelo de fasciolosis experimental en ratas como así también  la participación de los productos de excresión- secresión del parásito (PES) en la apoptosis de eosinófilos durante ensayos "in vitro". METODOS: A los 21 días  posteriores a la infección vía oral de ratas con 30 metacercarias de Fasciola hepatica se realizaron cortes histológicos de hígado sobre los cuales se investigó la presencia de células apoptóticas por la técnica de TUNEL y por microscopía electrónica. Para los ensayos in vitro, los eosinófilos se obtuvieron de exudado peritoneal por gradiente con Percoll. Tras cultivar las células con los PES o medio de cultivo como control se determinó la apoptosis por microscopía, en extendidos coloreados con May-Grünwald Giemsa y Bromuro de Etidio, y por citometría de flujo mediante la determinación de hipodiploidía en células coloreadas con Ioduro de Propidio. RESULTADOS: El análisis de los hígados demostró la presencia de células positivas para la reacción de TUNEL en el contexto de los focos inflamatorios y, por microscopía electrónica se observó que dichas células en apoptosis correspondían a eosinófilos. Los ensayos in vitro demostraron que los PES del parásito fueron capaces de inducir la apoptosis de eosinófilos en un porcentaje similar al obtenido por el tratamiento con dexametasona (conocido inductor de apoptosis en eosinófilos) y significativamente mayor respecto al control negativo. (p<0.05) CONCLUSIONES: Teniendo en cuenta que el eosinófilo es fundamental como célula efectora para el control de ésta parasitosis, nuestros resultados muestran que los antígenos excretados por Fasciola hepatica serían responsables de inducir la apoptosis de las mismas, favoreciendo así la propia sobrevida del parásito.