Desarrollo de una Plataforma Biotecnológica para la producción de Neuraminidasa recombinante del virus de Influenza A

L. E. FALETTI; N. URTASUN; A. M. TARGOVNIK; G. J. LEVIN; M. V. MIRANDA

Congreso; 7º Congreso y Exposición para la Industria Farmacéutica y afines; 2012

Las vacunas contra la gripe utilizadas actualmente son elaboradas a base de virus inactivados producidos en huevos de gallina embrionados. Frente a una pandemia, una alternativa para la producción rápida y masiva de vacunas es la expresión recombinante de los principales antígenos virales, la hemaglutinina (HA) y neuraminidasa (NA). La NA es una glicoproteína homotetramérica de ~240 kDa cuyos monómeros forman dímeros mediante puentes disulfuro. Es una enzima que cataliza la hidrólisis de ácido sciálico. Los anticuerpos anti-NA restringen la diseminación del virus y actúan disminuyendo la severidad de los síntomas de la enfermedad. En el presente trabajo, se construyeron distintos baculovirus recombinantes llevando los genes que codifican para dos variantes de la NA (con y sin dominio transmembrana, con-Tm y sin-Tm respectivamente) proveniente de la cepa viral Influenza A H1N1. Los mismos de usaron para infectar células de insecto (Sf9) y larvas de lepidópteros (Rachiplusia nu). Se estudió la cinética de expresión en células a través de western blot ensayos de actividad enzimática usando el sustrato fluorescente 4´metilumbeliferil-N-acetil-neuramínico (MUNANA). El rendimiento en celulas y larvas se calculó a traves de el mismo ensayo de actividad.