Estudio de la expresión génica de enzimas involucradas en el ciclo de la urea de hepatocitos aislados de rata sometidos a preservación y posterior reoxigenación.

ALMADA, L., BELLAROSA, C., GIRAUDI, P., MAMPRIN, M., MEDIAVILLA, M., GUIBERT, E., TIRIBELLI, C. Y RODRÍGUEZ, J.

Mar del Plata

Congreso; 1er Congreso Conjunto de Sociedades Biomédicas.; 2004

Sociedades Biomédicas - SAIC

Con el objetivo de desarrollar un dispositivo con funciones de hígado bioartificial, diseñamos un prototipo con funciones de minibioreactor para optimizar parámetros de función en escala mínima. El sistema consta de dos compartimientos, a- el plasmático (Cp) que es perfundido con sangre entera (de carnero), circulante a través de fibras huecas (140 fibras, polímero de poliester (PEPA), ­ø=210 µm, Vol sangre=16 mL) 6a un flujo de 9 mL/min y b- el compartimiento celular (Cc) que contiene 53±14.10(6) hepatocitos de rata (previamente preservados durante 72 hs a 0 ºCen solución UW) en un volumen máximo de 8.9±0.8 mL. El sistema contiene un oxigenador interno que aporta 12 mL/min de carbógeno. Durante un período de 120 min de funcionamiento se evaluaron los siguientes parámetros: Eficiencia de detoxificación de una carga de Amonio (EDA), la relación de osmolaridades (OsmCp/OsmCc), Viabilidad del componente celular (Exclusión de Azul de Tripan) y las conc. plasmáticas de Glucosa, Urea y Creatinina. Para evaluar la EDA, se administró una carga de Amonio que produjo una conc. plasmática de 0.345±0.037 mM (n=4). Al cabo de 120 min de perfusión la EDA fue del 75.4 ±9.8 % de la dosis (n=4 experiementos). Se estimó también la EDA del sistema funcionante sin células en las mismas condiciones experiementales. La OsmCp/OsmCc se mantuvo en 1.01±0.02 durante la perfusión indicando que no hubo restricción al flujo entre compartimientos Cp y Cc. La producción de glucosa del componente celular alcanzó 357±33 nmoles/10(6) cel a los 120 min de perfusión. Durante este período, la viabilidad del componente celular disminuyó 33±11%. El minibioreactor desarrollado presenta las siguientes ventajas respecto a otros diseños propuestos: 1- puede ser perfundido con sangre entera, 2- se utilizan volumenes mínimos de sangre y carga celular y 3- el componente celular (hepatocitos preservados 72 hs) conserva una marcada capacidad de detoxificación de amonio.