Preservación hipotérmica de hepatocitos aislados en solución de la Universidad de Wisconsin (UW). III- Expresión de b-actina en subpoblaciones celulares.

MEDIAVILLA, M.G., MAMPRIN, M.E., GUIBERT, E.E. Y RODRÍGUEZ, J.V.

Mar del Plata

Congreso; XL Reunión Científica de la Sociedad Argentina de Investigación Clínica; 1995

Sociedad Argentina de Investigación Clínica

Hepatocitos (H) y subpoblaciones celulares enriquecidas en hepatocitos perivenosos (PV) y periportales (PP) pueden ser preservados, en solución UW, hasta 96 hs. Esto contribuye al desarrollo del trasplante celular e hígado bioartificial. En este trabajo se analizan los efectos que las condiciones (UW-4ºC-N2) y el tiempo de preservación tienen sobre el citoesqueleto. Para ello estudiamos inmunocitoquímicamente a la proteina b-actina, como marcador de integridad estructural y funcional. Las células son aisladas por perfusión enzimática de colagenasa (H) y de Digitonina/colagenasa (PP y PV) y preservadas en UW. A t = 0 hs y t = 96 hs, son colectadas sobre portaobjetos donde se detecta b-actina mediante un sistema anticuerpo monoclonal anti-IgG conjugado con fosfatasa alcalina. El enriquecimiento de las subpoblaciones se establece por los contenidos de Glutamina Sintetasa (PP/PV = 0,63; pp = 0,30 ± 0,09; PV = 0,48 ± 0,04; n = 3; UA/mg prot.h.), Glutation-S-Transferasa (PP/PV = 0,90; PP = 0,35 ± 0,09, PV = 0,39 ± 0,10; n = 3; UI/mg prot) y agua intracelular (PP = 7,51 ± 1,29, PV = 9,28 ± 1,66, n = 3; µl ³H2O/106 cél). No hubo