Captación de [3H]-bilirrubina no conjugada (BNC) en hepatocitos aislados de hígado de rata en presencia de albúmina humana (AH).

MEDIAVILLA, M.G., CUPELLI, F., PASCOLO, L. Y TIRIBELLI, C.

Mar del Plata

Congreso; XLII Reunión Científica de la Sociedad Argentina de Investigación Clínica; 1997

Sociedad Argentina de Investigación Clínica

Estudiamos la captación de BNC en suspensiones de hepatocitos aislados de ratas Wistar hembra, en medio Hanks´ (pH=7,40) suplementado con ácido ascórbico (1mM), AH (100µM) y [3H]-BNC (19 a 59 µM). Conociendo que en estas condiciones experiementales la ka para la unión BNC-AH es de 6,74x106 M-1, determinamos la entrada de BNC libre incubando (a 37ºC y a 4ºC) los hepatocitos con [3H]-BNC y deteniendo el proceso por centrifugación a distintos tiempos. El transporte específico de BNC libre (41,75 nM) en función del tiempo (0 a 60 min.) resulta lineal hasta 2 min., saturándose a partir de los 30 min. (170,1 ± 5,22 pmol/mg prot). El análisis de las velocidades iniciales en función de la concentración de BNC libre (35 a 208nM) por Michaelis-Menten estableció valores de Vmáx= 108 ± 8,2 pmoles/ (mg prot. min.) y Km= 41,6 ± 11,6nM. Se establece la existencia de un transporte facilitado, saturable, para BNC en hepatocitos aislados en condiciones similares a las fisiológicas y se corroboran los resultados obtenidos anteriormente en vesículas de membrana de hígado de rata.