Identificación de proteínas involucradas en el transporte de cobre en Trypanosoma cruzi.

MERLI ML; MEDIAVILLA MG; CRICCO JA

Mendoza

Congreso; XI Congreso de la Sociedad Argentina de Protozoología; 2022

Sociedad Argentina de Protozoología

Trypanosoma cruzi posee un ciclo de vida complejo que incluye procesos de adaptación a distintos hospedadores. Este parásito debe suplir su cuota de cofactores metálicos para garantizar su supervivencia y, además, presentar un control estricto sobre su importación, distribución intracelular y almacenamiento para evitar su toxicidad. Actualmente estudiamos el transporte y distribución de cobre (Cu) en T. cruzi. Como primera aproximación, realizamos curvas de crecimiento de epimastigotes en condiciones de estrés de Cu por exceso y por defecto, agregando quelantes de Cu. Se observó una disminución significativa pero no deletérea del crecimiento de los parásitos a elevadas concentraciones de CuSO4 (mayores a 250 µM) y de quelante de cobre (mayores a 250 µM de BCS). Este amplio rango de tolerancia a los cambios en las [Cu], permite postular que el parásito presenta un mecanismo capaz de tolerar los excesos de Cu y garantizar su disponibilidad ante la disminución excesiva del mismo. Utilizando métodos bioinformáticos (TriTrypDB y herramientas asociadas) identificamos marcos abiertos de lectura que codificarían para proteínas con homología a transportadores y chaperones de Cu. Entre ellas las proteínas putativas a Pic2, Sco1, Sco2, Cox11, Cox17 y Cox19 de mitocondria y 3 copias de una ATPasa de Cu de tipo P del sistema de endomembrana involucradas en la exportación de Cu. También se identificaron 6 copias de homólogas a ferro-cuprorreductasas de membrana que podrían estar involucradas en la reducción de Cu2+ a Cu+ previo a su importación. Pero no se identificaron posibles transportadores de membrana ni chaperonas citosólicas, que están conservadas en otros organismos, para la distribución de Cu intracelular. Con esta información diseñamos estrategias para validar la funcionalidad de estas proteínas homólogas por complementación en S. cerevisiae. En función de los resultados preliminares obtenidos postulamos que T. cruzi tendría una vía de incorporación de Cu no conservada.