Efecto de la Maduración Meiótica sobre los Lípidos de las Plaquetas Vitelinas y Mitocondrias de Ovocitos V de Bufo arenarum

BUSCHIAZZO J; BRUZZONE A; ALONSO TS

La Plata, Argentina

Congreso; II Jornadas de Bioquímica y Biología Molecular de Lípido; 2003

Universidad de la Plata

Los ovocitos ováricos totalmente crecidos (estadío V) adquieren la competencia para ser fertilizados a través de la maduración. En Bufo arenarum, cuando se induce este proceso con progesterona, se observan modificaciones significativas en los lípidos de ovocitos V enteros. En este trabajo se analizó el efecto de la maduración sobre el nivel y composición de los lípidos de las plaquetas vitelinas y de las mitocondrias, importantes organelas que podrían estar estructural y funcionalmente relacionadas. Los ovocitos V se seleccionaron manualmente bajo lupa. La maduración se indujo con progesterona y se verificó por la ruptura de la vesícula germinal. Las fracciones subcelulares se obtuvieron por centrifugación diferencial. Los lípidos se extrajeron según Folch (1957) y se aislaron por cromatografía en capa fina. Se derivatizaron por metanólisis y los metil ésteres, purificados cromatográficamente, se cuantificaron en un cromatógrafo de reparto gas-líquido. El fósforo fosfolipídico se dosó por el método de Rouser (1970). La maduración determina una disminución en el contenido total de fosfolípidos tanto en las plaquetas vitelinas como en las mitocondrias fundamentalmente por la caída de fosfatidilcolina. En las plaquetas, los principales cambios en el perfil de ácidos grasos se observan en fosfatidilserina, fosfatidilcolina, ácido fosfatídico y esfingomielina. En las mitocondrias, las variaciones composicionales se registran en fosfatidiletanolamina y difosfatidilglicerol. En las dos fracciones subcelulares, la cantidad total de triacilglicéridos y diacilglicéridos se mantiene constante y el perfil de acilos de estos últimos varía significativamente.