Efecto in vitro de compuestos beta adrenérgicos en la línea tumoral mamaria humana MDA-MB-231

P¨¦REZ C; BRUZZONE A; CASTILLO LF; LUTHY IA

Mar del Plata

Congreso; 52 Reunión Científica Anual de la Sociedad Argentina Investigación Clínica; 2007

Sociedad Argentina de Investigación Clínica

Previamente describimos un efecto proliferativo de agonistas a2-adren¨¦rgicos en l¨ªneas tumorales mamarias humanas y murinas. El rol de los compuestos b-adren¨¦rgicos a¨²n no hab¨ªa sido completamente elucidado. El objetivo de este trabajo fue analizar su efecto in vitro en la l¨ªnea tumoral mamaria humana MDA-MB-231. Se realiz¨® inmunofluorescencia en microscopio confocal con anticuerpos espec¨ªficos comerciales. Para el ensayo de proliferaci¨®n, se incubaron las c¨¦lulas con el compuesto adren¨¦rgico en medio suplementado con 2% SFBA, con cambios de medio cada 24 hs durante 3 d¨ªas. El ¨²ltimo d¨ªa se agreg¨® la Timidina tritiada. Las c¨¦lulas se cosecharon y se cont¨® la radiactividad en un contador Beta. Por inmunofluorescencia en microscopio confocal detectamos tinci¨®n positiva para b2-RA y a2B-RA en estas c¨¦lulas. Al analizar el efecto del ligando end¨®geno epinefrina (EPI), se observ¨® un efecto estimulatorio significativo de la incorporaci¨®n de [3H]-Timidina. Por ejemplo: EPI 0.1nM: 124,3¡À8,2% respecto del control (p<0.05) y 1 nM: 138.7¡À7% (p<0.01). Considerando que la EPI se une a b2-RA y a2-RA, utilizamos entonces el agonista b-adren¨¦rgico isoproterenol (ISO) para elucidar este efecto. En este caso tambi¨¦n se observ¨® una estimulaci¨®n del crecimiento celular estad¨ªsticamente significativa. Ejemplos: ISO 10nM: 133.6¡À7.7% respecto al control (p<0.05); ISO 100 nM 151,6¡À5,4% (p<0.01). Por otro lado, al bloquear la acci¨®n de EPI sobre los receptores b-adren¨¦rgicos utilizando el antagonista b propanolol, no se observ¨® una reversi¨®n del efecto sobre la proliferaci¨®n. Este hecho podr¨ªa deberse a que los a2-RA tambi¨¦n median un efecto proliferativo. A partir de estos resultados se puede concluir que en las c¨¦lulas MDA-MB-231 tanto los receptores a y b-adren¨¦rgicos poseen efectos mitog¨¦nicos. Este efecto es opuesto en otras l¨ªneas celulares, en las que los receptores ¦Á2-RA estimulan y los ¦Â2-RA inhiben la proliferaci¨®n celular.