Polimorfismos del gen saa en aislamientos de Escherichia coli verotoxigénico del serotipo O20:H19

KRÜGER, ALEJANDRA; LUCCHESI, PAULA M. A.; SANZ, MARCELO E.; PADOLA, NORA L.; PARMA, ALBERTO E.

Buenos Aires

Congreso; XVII Congreso latinoamericano de Microbiología y X Congreso argentino de Microbiología; 2004

Asociación Latinoamericana de Microbiología y Asociación Argentina de Microbiología

Escherichia coli verotoxigénico (VTEC) representa un grupo muy importante de patógenos emergentes involucrados en cuadros de intoxicaciones alimentarias. El ganado bovino ha sido identificado como su principal reservorio, siendo la carne vacuna un importante vehículo de transmisión. VTEC puede causar diarrea y severas enfermedades en seres humanos, tales como la colitis hemorrágica (CH) o el síndrome urémico hemolítico (SUH). La patogénesis de esta infección no está totalmente comprendida e involucra varios factores bacterianos y del huésped. En este trabajo nos centramos en el estudio del gen saa en cepas VTEC pertenecientes al serotipo O20:H19. Este gen, presente en algunas cepas carentes de intimina, codifica una adhesina que presenta variantes de tamaño por diferencias en una región repetitiva, relacionadas con distinta capacidad de adherencia a células Hep-2. Las cepas que estudiamos se habían aislado en nuestro laboratorio de distintas fuentes (hamburguesas, bovinos en pastoreo, “feedlot” y matadero) y caracterizado en cuanto a sus factores de virulencia (vt1, vt2, ehxA y eae). Además habíamos estudiado sus perfiles genéticos por la técnica de análisis de ADN polimórfico amplificado al azar (RAPD). Nuestro objetivo fue estudiar la presencia de este gen en aislamientos pertenecientes al serotipo O20:H19, sobre el cual aún no se ha publicado la presencia de este gen, y determinar la existencia de variantes en el caso que estuviera presente. Para la detección de saa utilizamos la técnica de PCR con “primers” específicos de la región conservada del gen, y para sus variantes diseñamos otro par de “primers” para amplificar la región repetitiva responsable de los diferentes tamaños. De las cepas estudiadas, 5 de 7 presentaron el gen saa. Una de ellas tenía la variante 2, otras tres la variante 3 y la quinta, una nueva variante que denominamos “5”,  que corresponde al  mayor tamaño encontrado hasta el momento. De estos resultados se destaca la gran variabilidad genética del gen saa presente en aislamientos de un mismo serotipo lo cual nos permitió diferenciar aislamientos que por el resto de sus factores de virulencia eran idénticos, resaltando la importancia de este gen como marcador para el estudio de la cadena epidemiológica de esta enfermedad, en cepas eae negativas