Caracterización de bacteriófagos para el biocontrol de Escherichia coli productor de toxina Shiga: resistencia a diferentes temperaturas y pH

JUÁREZ ANA ELISA; KRÜGER ALEJANDRA; LUCCHESI PAULA M. A.

Tandil

Congreso; II CONGRESO DE MICROBIOLOGÍA VETERINARIA; 2023

Facultad de Ciencias Veterinarias. Universidad Nacional del Centro de la Provincia de Buenos Aires

Escherichia coli productora de toxina Shiga (STEC) es una bacteria de alto impacto en la salud pública. STEC causa diarrea, colitis hemorrágica y síndrome urémico hemolítico (SUH). El ganado bovino es uno de sus principales reservorios y al excretar STEC en sus heces, pueden contaminarse el ambiente, el cuero del animal o la carne durante la faena. Dado que no existe un tratamiento específico para el SUH, es fundamental el control de STEC en alimentos. Los bacteriófagos (fagos) y/o sus enzimas surgen como una alternativa prometedora para reducir patógenos transmitidos por alimentos. Los fagos candidatos para biocontrol deben ser evaluados frente a diferentes factores, para determinar su resistencia y las condiciones óptimas para su conservación o inactivación completa. En este trabajo nos propusimos evaluar la viabilidad de fagos líticos para STEC, luego de distintos tratamientos. Evaluamos cinco fagos (stocks de alto título) luego de una incubación de 60 minutos a distintas temperaturas (4, 20, 40, 60 y 75°C) a pH 7 y diferentes condiciones de pH (2, 3, 4, 7 y 10) a 25°C. Los experimentos se realizaron por duplicado y los títulos fágicos se determinaron mediante diluciones en ensayo de spot test. Observamos que, luego de las incubaciones a 4°, 20° y 40°C el título fágico se mantuvo para la totalidad de los fagos. Sin embargo, luego del tratamiento a 60°C cuatro fagos disminuyeron 1 log su título, mientras que luego de 75°C no pudieron detectarse fagos infectivos. La totalidad de los fagos conservó su título luego de los tratamientos a pH 4,7 y 10. Mientras que a pH 3 el título de dos fagos se redujo 1 log y no se pudo detectar fagos infectivos en otro caso, y a pH 2 no se detectaron fagos infectivos en ningún caso. Dado que componentes de los alimentos o del ambiente en que se encuentren pueden producir condiciones que disminuyan el título de los fagos, fue importante determinar que varios de éstos resistieron temperaturas elevadas (60°C), acidez (pH 3) y/o alcalinidad (pH10). Además, observamos que temperaturas ≥75°C o pH ≤2 serían condiciones para la inactivación de estos fagos.