Evaluación microbiológica de muestras de agua subterránea de tambos

DUALDE MELANY; NIETO FARÍAS M. VICTORIA; PASSUCCI JUAN A; JUÁREZ ANA ELISA; PASCAL STEFANÍA; TABERA, ANAHÍ E; LUCCHESI PAULA M. A.; KRÜGER ALEJANDRA

Tandil

Jornada; I Jornada Integrada en Investigación y Salud; 2023

Sistema Integrado de Salud Pública SISP-Tandil (SISP), la Universidad Nacional del Centro de la Provincia de Buenos Aires (UNCPBA) y el Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas (CONICET) - Tandil. .

En los tambos se utilizan grandes volúmenes de agua para el desarrollo de diferentes actividades. La mayor parte del agua luego vuelve al ambiente en forma agua residual y estiércol, los cuales pueden contener considerables cantidades de nutrientes, residuos de medicamentos, metales pesados y microorganismos. Si los efluentes generados nos son gestionados adecuadamente, pueden contribuir a la contaminación de ríos y aguas subterráneas. La contaminación microbiológica puede presentar un problema adicional para la salud humana y animal si contiene microorganismos resistentes a antimicrobianos. Los objetivos de este trabajo son evaluar la calidad microbiológica en muestras de agua subterránea de tambos de la Cuenca Mar y Sierras, y analizar la presencia de microorganismos con resistencia a antimicrobianos.Se recolectaron muestras de agua del sitio más cercano al pozo de extracción en 20 tambos, en dos épocas del año (otoño/invierno-primavera/verano). Se procesaron alícuotas de 100 ml de las muestras por el método de filtración por membrana (0,45 μm). Los filtros se colocaron sobre placas comerciales Compact Dry EC para detección de coliformes totales y Escherichia coli y Cetrimide 14075 (Sartorius) para Pseudomonas aeruginosa, y en placas de LB suplementadas con ampicilina (35 µg/ml) o tetraciclina (20 µg/ml) para la detección de bacterias resistentes a dichos antimicrobianos. Las placas se incubaron a 37ºC durante el tiempo correspondiente. En los casos que hubo crecimiento, se seleccionaron hasta 5 colonias individuales crecidas por placa y se incubaron en caldo LB por 5 h. Los cultivos se guardaron a -80 ºC con glicerol (20%).Paralelamente, se siguieron los procedimientos de la norma ISO 10705-2:2000 para detección de colifagos somáticos de muestras de agua por el método de doble capa de agar y por spot test. Se levantaron placas de lisis o zonas de lisis (máximo 5 por muestra) y se guardaron en buffer SM a 4 °C.Actualmente, se están analizando por PCR pooles de cultivos de las colonias seleccionadas para detectar genes asociados a resistencia a antimicrobianos. Se detectaron coliformes totales, E. coli y P. aeruginosa en el 75%, 25% y 5% de las muestras, respectivamente. Por medio de los métodos de doble capa de agar y/o spot test, se detectaron colifagos somáticos en el 47.5% (19/40) de las muestras. Se observó crecimiento bacteriano en el 17% de los filtros colocados sobre LB con tetraciclina y en el 60% de los crecidos sobre LB con ampicilina. Las reacciones de PCR realizadas en los cultivos de las bacterias seleccionadas evidenciaron presencia de tetA, tetB, blaTEM y blaCTX-M-1.Los análisis realizados mostraron que un importante número de muestras de agua obtenidas a partir de pozos de extracción de tambos de la zona no cumplían con criterios microbiológicos para agua potable establecidos por el CAA y, además, se evidenció presencia de colifagos somáticos que han sido propuestos también como indicadores en otros países. Asimismo, se detectaron bacterias portadoras de genes de resistencia a antimicrobianos (tetA, tetB, blaTEM y blaCTX-M-1).Los resultados obtenidos alertan sobre la importante proporción de establecimientos que presentan contaminación microbiológica del agua que utilizan para sus actividades y consumo, lo cual representa una amenaza para la salud humana y animal.