Detección y cuantificación de colifagos somáticos en efluentes de tambos

DUALDE MELANY; JUÁREZ ANA ELISA; LUCCHESI PAULA M. A.; KRÜGER ALEJANDRA

Buenos Aires

Jornada; II Jornadas Latinoamericanas de Bacteriófagos; 2022

La actividad del ordeñe genera grandes volúmenes deefluentes que contienen elevados porcentajes de materia orgánica, nutrientes ysales; así como también pueden incluir metales pesados, restos de productosveterinarios y patógenos. Si  estosefluentes alcanzan los cursos de agua superficiales y subterráneos degradan sucalidad y constituyen una amenaza para el medio ambiente y la salud. Por ello,actualmente se busca obtener mayor información de la problemática de losresiduos generados que contribuya a las alternativas de gestión y monitoreo.Los colifagos somáticos son bacteriófagos que infectan a E. coli a través del reconocimiento de receptores ubicados en supared celular. Dadas  suscaracterísticas, como por ejemplo su persistencia en el agua y su resistencia atratamientos de aguas residuales similares a las de los virus, autoridadesregulatorias de distintos países han propuesto incluir a los colifagos comoindicadores de calidad del agua y en el monitoreo de calidad microbiológica deaguas residuales y de efluentes tratados. Nuestro objetivo fue evaluar lapresencia y determinar los niveles de colifagos somáticos en efluentes líquidosy sólidos de tambos de la Cuenca Mar y Sierras. Se recolectaron muestras delíquidos y sólidos de los efluentes no tratados, a la salida del tambo, en 16establecimientos. Se siguieron procedimientos para la detección ycuantificación de fagos similares a los establecidos para muestras de agua enla norma ISO 10705-2:2000. Para determinar presencia/ausencia en 1 ml o 1 g de muestra, se tomó laalícuota correspondiente y se incubó overnight con la cepa hospedadora E.coli WG5. Luego se analizaron gotas de este cultivo (previo tratamiento concloroformo) por el método de spot test. En paralelo, se realizó laenumeración de unidades formadoras de placas (UFP)/ml o UFP/g. Para ello, secentrifugaron las muestras de efluentes líquidos y diluciones 1/10 en LB de lasmuestras sólidas y se procesaron alícuotas de los sobrenadantes por el métodode doble capa. En todos los ensayos se incluyó el fago φ174 como control. Sedetectó la presencia de colifagos somáticos en todas las muestras. Losefluentes líquidos mostraron títulos entre 1,06 102 y 2,20 105UFP/ml de muestra, con una mediana de 7,35 103 UFP/ml y losefluentes sólidos entre 3,80 102 y 1,65 106 UFP/g demuestra, con una mediana de 7,20x103 UFP/g. En la gran mayoría delas muestras se observaron dos o más morfologías diferentes de placas de lisis,sugiriendo la presencia de distintos colifagos. Losniveles de colifagos somáticos detectados en los efluentes de tambo seencuentran dentro del rango informado por otros estudios en materia fecal debovinos y en aguas residuales de mataderos, como también a los reportados enaguas domiciliarias no tratadas. Los resultados de este trabajo sugierenque los colifagos podrían evaluarse como una opción para controlar laeficiencia de tratamientos de los efluentes originados por la actividadlechera.