Determinación cuantitativa de ADN libre en plasma de pacientes con Leucemia Mieloide Crónica mediante PCR en tiempo real

NILVA G, BOSQUIAZZO VL, PADUÁN B, CUESTAS V, VARAYOUD J, RAMOS JG.

Congreso; LVIII Reunión Científica Anual de la Sociedad Argentina de Investigación Clínica; 2013

En respuesta al tratamiento, los pacientes con leucemia mieloide crónica (LMC) deberían alcanzar remisión hematológica (hemograma normal), citogenética (ausencia de cromosoma Filadelfia) y molecular (porcentaje de BCR-ABL/ABL ≤ 0,01% en escala internacional). En los últimos años se ha asociado la presencia de ADN libre en plasma a procesos oncológicos. Nuestro objetivo fue establecer el rango de normalidad de la concentración de ADN libre en plasma y evaluar si dicho parámetro puede utilizarse como un factor pronóstico de respuesta al tratamiento en pacientes con LMC. Se utilizaron muestras de plasma de 20 individuos clínicamente sanos y de 6 pacientes con LMC al diagnóstico y al cabo de diferentes meses después de iniciado el tratamiento. Se aisló el ADN libre de cada muestra usando el kit QIAamp DNA Blood Mini (Qiagen) y su concentración total se evaluó por PCR en tiempo real para la determinación del gen de β-globina. A los pacientes con LMC también se les extrajo una muestra de sangre para la cuantificación de la expresión del gen de fusión BCR-ABLpor PCR en tiempo real.El rango de concentración normal de ADN libre en plasma fue de 0.052-0.244 ng/μl. La concentración de ADN libre en plasma de pacientes con LMC al momento del diagnóstico de la enfermedad fue significativamente mayor que los valores obtenidos en una etapa avanzada de tratamiento (p < 0,05). La concentración de ADN libre en plasma de los pacientes con LMC se correlacionó positivamente con la respuesta hematológica (p < 0,05), pero no existió correlación con la respuesta molecular, evaluada por la determinación de la expresión de BCR-ABL. Estos resultados sugieren que la cuantificación del ADN libre en plasma podría constituir un factor pronóstico sensible que indicaría éxito terapéutico en la fase crónica de la LMC.