Análisis de la asociación de Papilomavirus Humano (HPV) en neoplasias de laringe

CHOUHY, DIEGO; CAVATORTA, ANA LAURA; NOCITO, ANA LIA; GARDIOL, DANIELA; GIRI, ADRIANA A.

Buenos Aires

Congreso; VIII Congreso Argentino de Virología; 2005

Sociedad Argentina de Virología

El epitelio de laringe es susceptible a la infección por HPV y permisivo para sostener su replicación. La secuencia de eventos virales y carcinogenéticos serían similares a la del carcinoma de cuello uterino aunque el rol del HPV en las neoplasias de laringe no es tan claro como en las cervicales. Las proteínas E6 derivadas de HPV de alto riesgo interaccionan y estimulan la degradación de proteínas regulatorias celulares, entre ellas, el oncosupresor DLG (Disc large). DLG interviene en la organización y funcionalidad de las uniones intercelulares. Su degradación por parte de E6 resulta en una disminución de sus niveles lo que provoca alteraciones en la adhesión, polaridad y proliferación celular. Estas alteraciones contribuyen a la transformación celular, explicando las características fenotípicas de las células malignas observado en las lesiones cervicales. Secuencias de diversos tipos de HPV, de alto y de bajo riesgo, han sido detectadas por métodos moleculares en papilomas, lesiones premalignas y carcinomas de laringe. Sin embargo, los datos reportados en la bibliografía sobre esta asociación son muy discordantes. El objetivo de este trabajo es el análisis de la asociación de HPV en neoplasias de laringe. Para ello, analizamos 43 casos derivados de pacientes de la ciudad de Rosario (39 carcinomas y 4 papilomas de laringe) mediante histología y PCR. Para el análisis histológico, el material bióptico fue fijado en formol al l0%, incluido en parafina y coloreado con Hematoxilina-Eosina. Para el análisis molecular, el ADN viral fue obtenido a partir de los mismos cortes histológicos previa desparafinización. La presencia de HPV e identificación de tipos oncogénicos (HPV-16,-18,-31,-33,-35) fue determinada con un sistema basado en PCR con revelado colorimétrico en microplaca optimizado en nuestro laboratorio. La evaluación histológica demostró la presencia de coilocitos en 7 casos (16.3%): 4 correspondían a papilomas y 3 a carcinomas. Secuencias de HPV fueron detectadas con el ensayo molecular en 12 de los 43 casos (27.9%), utilizando una sonda genérica que permite la detección de la mayoría de los HPV mucosotrópicos. Un caso de carcinoma in situ y 3 de los casos de papiloma fueron HPV-positivos pero no pudieron ser tipificados con sondas específicas para los tipos oncogénicos analizados en este trabajo. Estos 4 casos podrían estar asociados a HPV de bajo riesgo y/o a HPV oncogénicos distintos de HPV-16,-18,-31,-33,-35. La presencia de HPV oncogénicos fue confirmada con sondas específicas en 7 casos de carcinomas HPV-positivos (3 resultaron HPV-16-positivos y 4 presentaron infecciones mixtas de HPV-16 y –33) y en un caso de papiloma (infección mixta de HPV-16 y -33). En este último caso analizamos la expresión de DLG por inmunohistoquímica, para investigar la posible contribucion de la degradacion de este oncosupresor por E6 en la carcinogenesis de laringe. Pudimos observar un patrón de expresión con alteraciones en la distribucion celular y tisular de manera similar a lo observado en muestras de lesiones cervicales intraepitelilales. El análisis de la de expresión de DLG en las muestras de laringe asociadas a infecciones por HPV de alto riesgo, podría contribuir al entendimiento de los procesos que participan en el desarrollo de neoplasias de laringe y correlacionarse con lo observado en lesiones cervicales. En conclusión, la infección de HPV podría estar involucrada en algunos tipos de neoplasias de laringe.