Estudio de la expresión transcripcional del gen E6 de HPV de alto riesgo en el microambiente epitelial.

MORIENA, LUCÍA; BARBIERI, GUIDO; BUGNON VALDANO, MARINA; MARZIALI, FEDERICO; BOCCARDO, ENRIQUE; GARDIOL, DANIELA; CAVATORTA, ANA LAURA

Encarnación

Congreso; XXV Jornadas de Jóvenes Investigadores de AUGM; 2017

Asociación de Universidades Grupo Montevideo

Los papilomavirus humanos (HPV) infectan una variedad de sitios anatómicos y sus proteínas virales se expresan diferencialmente en los distintos estratos epiteliales. La capacidad de transformación celular de los HPV de alto riesgo oncogénico está codificada en un preARNm policistrónico, donde un evento de splicing alternativo que tiene lugar en el transcripto de los genes E6/E7, conduce a la traducción de las oncoproteínas E6, E7 y E6 estrella. Las mismas son requeridas para la replicación viral e interfieren con la función de proteínas celulares claves en la regulación de la proliferación y diferenciación. Poco se conoce de la expresión diferencial de una u otra isoforma de E6 durante la diferenciación del epitelio y, por tanto, de los posibles efectos sobre los blancos celulares.El objetivo de este trabajo es evaluar la expresión de las diferentes isoformas de E6 de HPV-18 a lo largo del epitelio mediante PCR en tiempo real. Dada la estrecha relación del ciclo de replicación del HPV con el programa de diferenciación de los epitelios que infecta, los cultivos organotípicos raft, constituyen herramientas útiles para el estudio de estos virus. Utilizando la técnica de microdisección por captura láser, discriminamos cada uno de los estratos de este tejido expresando las oncoproteínas virales y analizamos los patrones de expresión de las isoformas de E6 en cada capa del epitelio.Los resultados obtenidos sugieren que el proceso de diferenciación celular a lo largo del epitelio infectado va acompañado de un aumento tanto en la expresión de E6, como en el nivel de splicing de los transcriptos generados. Así, determinamos los cambios en la expresión de los transcriptos de E6 de HPV-18 a través de los distintos estratos de cultivos organotípicos.