Estudio de la degradación de la proteína supresora de tumores hDLG mediada por la proteína E6 derivada de HPV de alto riesgo y su relación con la progresión de lesiones cervicales

FUMERO, GASTÓN; CAVATORTA, ANA LAURA; CHOUHY, DIEGO; NOCITO, ANA LIA; GIRI, ADRIANA A.; GARDIOL, DANIELA

Rosario

Congreso; V congreso y XXII Reunión Anual de la Sociedad de Biología de Rosario (SBR); 2002

Sociedad de Biología de Rosario (SBR)

Los Papillomavirus humanos (HPV) infectan células epiteliales y datos epidemiológicos han demostrado que HPV juega un rol causal en el desarrollo de cáncer anogenital. Las proteínas E6 derivadas de HPV de alto riesgo interaccionan con la proteína celular oncosupresora DLG (Discs large), estimulando su degradación por el mecanismo dependiente de ubiquitina. La proteína oncosupresora DLG, interviene en la organización y funcionalidad de las interacciones célula-célula. La desregulación de estas estructuras, conlleva a una defectuosa adhesión celular con pérdida de polaridad, descontrol de la proliferación y alteraciones en el programa de diferenciación. Dadas las funciones de DLG en las células, su degradación mediada por la proteína E6, podría ser considerada una nueva actividad oncogénica de dicha proteína viral, pudiendo contribuir al fenotipo transformado e indiferenciado que presentan las células que expresan E6 establemente. El objetivo de este trabajo consiste en establecer la importancia de esta nueva actividad de E6 en infecciones in vivo, así como su incumbencia en la evolución y progresión de las lesiones provocadas por infecciones de HPV en mucosas genitales. Los niveles de DLG en cortes histológicos provenientes de biopsias de mucosa cervical fueron analizados por inmuohistoquímica, utilizando un anticuerpo monoclonal anti- DLG. La puesta a punto del protocolo se realizó utilizando como muestra tejido normal que no presentaba lesiones asociadas a infecciones por HPV. A posteriori fueron analizados cortes histológicos provenientes de lesiones intraepiteliales de diferentes grados. La presencia y tipificación de HPV en dichas muestras se determinó por un método de PCR colorimétrico utilizando sondas género y tipo-específicas. Se observó que en tejidos normales la expresión de DLG se limita a las células de los estratos basales y parabasales del epitelio escamoso del ectocérvix. Sin embargo en lesiones intraepiteliales de alto y bajo grado asociados a HPV, se observó que la expresión de DLG se extiende a otros estratos suprabasales del epitelio y que sus niveles son mayores en comparación con tejidos normales. Estudios preliminares trabajando con muestras derivadas de carcinomas invasores demostraron que el nivel de expresión de DLG disminuye notablemente con respecto a las lesiones intraepiteliales. Dicha disminución es más notable en las células que invaden el tejido subyacente. Estos resultados sugerirían que la degradación de DLG mediada por E6 podría estar involucrada en los procesos de invasión de las células malignas. Los datos obtenidos a partir de la ejecución de este proyecto aportarán al conocimento integral de los procesos carcinogenéticos.