Importancia de las infecciones por papillomavirus humano (HPV) en los procesos de transformación maligna.

CAVATORTA, ANA LAURA; BERCOFF, MAYARÍ; CHOUHY, DIEGO; NOCITO, ANA LIA; GARDIOL, DANIELA; GIRI, ADRIANA A.

Tucumán

Jornada; XIII Jornadas de Jóvenes Investigadores de AUGM; 2005

Asociación de Universidades Grupo Montevideo - Universidad Nacional de Tucumán

Los Papillomavirus humanos (HPV) son un grupo de virus no envueltos con genoma a ADN doble hebra circular y se caracterizan por infectar epitelios cutáneos y de mucosas. Los HPVs que infectan las mucosas genitales han sido clasificados en dos grupos, los de alto y los de bajo riesgo, según las manifestaciones clínicas que provocan sus infecciones. Los de alto riesgo, tal como el HPV-16, se encuentran asociados con distintas lesiones que pueden progresar hasta carcinomas de cuello de útero de carácter invasor. El genoma de los HPV de alto riesgo es mantenido en forma episomal en lesiones benignas y pre-cancerosas mientras que en lesiones de alto grado y en carcinomas cervicales se encuentra integrado al genoma celular. Por lo tanto la integración es considerada un evento clave en la progresión a cáncer cervical, ya que provoca la ruptura del gen E2 que codifica para una proteína que reprime la expresión de las oncoproteínas E6 y E7. E6 estimula la degradación de proteínas celulares reguladoras tales como p53, c-myc, bak y DLG. El oncosupresor DLG está asociado a las interacciones célula-célula y la desregulación de estas estructuras conlleva a alteraciones de la adhesión, polaridad y proliferación celular. El objetivo general de este trabajo es el estudio de los mecanismos moleculares de las infecciones por HPV que contribuyen al desarrollo de cáncer. En particular, analizamos las variaciones en los niveles de DLG en relación al estado físico del ADN de HPV. Para ello evaluamos las contribución de la actividad oncogénica de E6 analizando la expresión de DLG en muestras histológicas derivadas de lesiones cervicales asociadas a HPVs de alto riesgo por inmunohistoquímica. Los resultados demostraron que en las lesiones intraepiteliales cervicales, DLG se expresa con un patrón de distribución celular diferente al del tejido normal mientras que en los carcinomas cervicales invasores se observó una marcada reducción en sus niveles. Con el propósito de estudiar la importancia de la integración del ADN viral en la progresión a cáncer, evaluamos el valor pronóstico del cociente E2/E6 como marcador de progresión maligna en estas lesiones. Para ello diseñamos y optimizamos  un ensayo de co-amplificación génica con revelado colorimétrico de fragmentos de E2 y E6 de HPV-16 utilizando controles plasmídicos y líneas celulares HPV-16-positivas. Este ensayo permitirá correlacionar el grado de severidad de las lesiones con el nivel de integración viral y su contribución en los procesos de progresión maligna asociados a HPV.