Formación de fotoaductos fluorescentes de Pterina y péptidos de interés biomédico

FARÍAS, JESUÁN J.; THOMAS, ANDRÉS H.; LHIAUBET-VALLET,VIRGINIE; DANTOLA, MARIA LAURA

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Congreso; V Reunión del Grupo Argentino de Fotobiología; 2020

Grupo Argentino de Fotobiología

La fotoalergia es un trastorno de fotosensibilidad cutánea asociado a una modificación de la habilidad de la piel para reaccionar con el efecto combinado de una droga y la luz solar. Es el resultado de la conversión de un xenobiótico a un antígeno, luego de la activación fotoquímica en sistemas biológicos. Se atribuye a la formación de una proteína modificada por unión covalente a una droga (fotosensibilizador, intermediario fotoquímico o fotoproducto); que actúa como antígeno desencadenando una respuesta inmune.1 Los agentes fotoalergénicos reportados suelen ser compuestos exógenos, tales como antifúngicos, protectores solares, entre otros. Sin embargo, hasta el momento, se conocen pocos agentes endógenos capaces de desencadenar este tipo de proceso.Las pterinas son compuestos heterocíclicos que participan en numerosas funciones biológicas. En determinadas situaciones patológicas, como es el vitiligo, se acumulan en las manchas depigmentadas de la piel. Bajo excitación UV-A, son capaces de generar daño fotoinducido en ADN,2 proteínas3 y sus componentes. Recientemente hemos demostrado que la pterina (Ptr), derivado no sustituido, bajo radiación UV-A se une covalentemente a Ubiquitina (Ub), generando un fotoaducto que conserva las propiedades espectroscópicas del fotosensibilizador.4 El análisis por espectrometría de masa, sugiere que la Ptr se une a los residuos de lisina (K) e histidina (H) de Ub. Con el fin de profundizar en el estudio de la capacidad de Ptr de formar fotoaductos con proteínas y su posible implicancia en procesos de fotoalergia, el objetivo principal de este trabajo es estudiar si Ptr es capaz de formar fotoaductos en sistemas más sencillos, tales como péptidos y aminoácidos libres, como así también, identificar su sitio de unión. Para llevar a cabo este estudio se utilizaron como molécula blanco el aminoácido K y un péptido análogo a la hormona estimulante de la melanogénesis, al cual hemos llamado MSHYW, en el cual se conservó el residuo de K pero se remplazaron los residuos de H y metionina por Glicina. Soluciones acuosas ácidas de Ptr y la molécula blanco fueron expuestas a radiación UV-A (350 nm) por diferentes períodos de tiempo y a distinta concentración de O2. Las muestras irradiadas fueron analizadas por espectrofotometría UV-Vis, HPLC, fluorescencia estacionaria y resuelta en el tiempo y espectrometría de masas.Los resultados obtenidos indican que como resultado de la exposición a la radiación de K en presencia de Ptr, en condiciones anaeróbicas, se forma un único producto cuyas propiedades espectroscópicas son compatibles con la presencia de Ptr en la estructura molecular del mismo. Este producto no se observa en presencia de O2. Por otra parte, el análisis por espectrometría de masas de las muestras irradiadas de MSHYW y Ptr, en ausencia de O2, confirman que se forma un producto con un peso molecular compatible a la unión de una molécula de Ptr a MSHYW.Bibliografía 1 S. Montaro, et.al.,Chem. Med. Chem, 4, 1196 (2009)2 G. Petroselli, et al., J. Am. Chem. Soc., 130, 3001 (2008)3 L.O. Reid, et.al, Biochemistry, 55(34), 4777 (2016)4 L. O. Reid, et.al, Chem. Res. Toxicol., 32, 2250 (2019)