El transporte de catepsina D en células tumorales podría ser mediado por receptores

BANNOUD N; CARVELLI FL; VARGAS-ROIG LM; SOSA MA

Mar del Plata

Congreso; LX REUNIÓN DE LA SOCIEDAD ARGENTINA DE INVESTIGACIÓN CLÍNICA (SAIC); 2015

Sociedad Argentina de Investigación Clínica

La secreción aberrante de hidrolasas lisosomales, tal como procatepsina D (proCatD), es un cambio fenotípico común en muchos cánceres humanos que favorece la invasión y metástasis tumoral. El transporte de esta enzima a lisosomas es mediado por receptores a manosa-6-P (MPRs), sortilina o vías alternativas. Se han descripto dos formas de MPRs: catión-dependiente (CD-MPR) y catión-independiente, de los cuales el CD-MPR participaría en la exocitosis de enzimas lisosomales. En células de tumores mamarios malignos se desconoce aún el mecanismo de secreción de proCatD al medio extracelular. Algunos autores lo atribuyen a un defecto en la acidificación de compartimientos (Kokkonen 2004). En base a estas hipótesis, estudiamos el efecto del cloruro de amonio (una amina acidotrópica que impide la correcta acidificación de compartimientos intracelulares), sobre la expresión y distribución de los receptores que podrían estar involucrados en el transporte intracelular de la enzima en la línea celular MCF-7 (derivada de adenocarcinoma ductal mamario, que expresa receptores a estrógeno). Mediante inmunoblot e inmunofluorescencia indirecta, observamos que el tratamiento con cloruro de amonio durante 6, 12, 18 y 24h aumentó la expresión de la forma inmadura de catepsina D en células MCF-7, indicando que la misma no es procesada en lisosomas. A su vez, la amina indujo un aumento en la expresión del CD-MPR y una disminución de sortilina. El primer efecto podría atribuirse a un bloqueo en el reciclaje del receptor desde un compartimiento acídico al aparato de Golgi, mientras que el segundo efecto podría deberse a que la neutralización de los compartimientos induzca la secreción de exosomas y consecuentemente la liberación de sortilina al medio extracelular, tal como lo han propuesto otros autores (Wilson 2014). Estos resultados sugieren que: el transporte intracelular de proCatD es mediado por receptores en células MCF-7, y que su secreción no se debe a un defecto en la acidificación de compartimientos en esta línea celular.