LA CONFIGURACIÓN DE APOLIPOPROTEÍNA A-I EN PARTÍCULAS

EDUARDO D. PRIETO; HORACIO A. GARDA

Villla Carlos Paz, Cordoba, Argentina

Congreso; XXXIV Reunión Anual de la Sociedad Argentina de Biofísica; 2005

Sociedad Argentina de Biofísica, SAB

La interacción de apolipoproteína A-I (apoAI) con membranas celulares resulta en su lipidización y formación de lipoproteínas de alta densidad discoidales de migración electroforética pre-b. Estas pre-b HDL, son también secretadas por el hígado, son transformadas en las a-HDL esféricas mayoritarias en circulación por acción de lecitin-colesterol aciltransferasa (LCAT), que eterifica al Col y forma un núcleo hidrofóbico de CE. La mayoría de los estudios estructurales de HDL discoidales han sido realizados en partículas reconstituidas (rHDL) ?in vitro? por diálisis de micelas mixtas con un detergente como colato, y menos comúnmente por la reacción espontánea de apoAI con fosfolípidos (como DMPC) en la temperatura de transición de fase. Los diferentes modelos de HDL discoidales, aunque difieren en la organización de la proteína, coinciden en que una bicapa de fosfolípidos es rodeada en su borde por dos moléculas de apoAI. No se ha estudiado, sin embargo, si los diferentes métodos de reconstitución resultan en una diferente organización de la proteína en el disco. En este trabajo fueron utilizados mutante de apoA-I con un único residuo de Trp en partículas discoidales de DMPC preparadas por estos diferentes métodos, en condiciones en que existe dos apoA-I por partículas, y midiendo la fluorescencia y anisotropía a diferente longitudes de onda para detectar y cuantificar homo transferencia de energía de resonancia entre los residuos de Trp de cada apoA-I existente en las partículas. También se realizaron partículas con un péptido central de apoA-I. Todos estos resultados dan cuenta que la organización proteica en las partículas depende del método de preparación.