Configuración de apolipoproteína A-I en complejos lipoproteícos discoidales.

CUELLAR, LUZ ANGELA; EDUARDO D. PRIETO; CAREGNATO, PAULA; GARDA H.A

Buenos Aires Argentina

Congreso; XL Reunión Anual de la SAB; 2011

Las lipoproteínas discoidales de alta densidad (dHDL) son intermediariosclaves en el eflujo lipídico celular mediado por apolipoproteína A-I (apoAI).Las mismas son secretados por el hígado o se originan por la interacción deapoAI con células. Por la dificultad de su aislamiento, la mayoría delconocimiento proviene de estudios con dHDL reconstituidas. El métodomás usado para ello es la diálisis con detergentes (1), aunque tambiénpueden obtenerse por la reacción espontánea de apoAI con las vesículasfosfolipídicas en la temperatura de transición de fase, un proceso que puedeser similar a la lipidación ?in vivo? de apoAI. as dHDL consisten de unabicapa lipídica discoidal rodeada por dos moléculas anti-paralelas de apoAIcon sus hélices perpendiculares a las cadenas hidrocarbonadas de loslípidos. En dHDL obtenidas por diálisis de colato se detectaron dosordenamientos co-existentes (2): Uno con las hélices 5 en yuxtaposición(LL5/5), y la segunda con la hélice-5 de una molécula de apoAI yuxtapuestacon la hélice 2 de la otra molécula (LL5/2). n el presente trabajo se usarontres mutantes de cisteína (K107C, K133C y K226C) marcadasextrínsecamente con grupos fluorescentes. En discos preparados con ellasmediante ambos protocolos, se estimaron las distancias intermolecularesentre las posiciones marcadas por homo- y hetero-transferencia de energíausando mediciones de intensidad, anisotropía y tiempo de vida defluorescencia. Los datos indican la coexistencia de ambas configuracionesen dHDL generado por colato, pero sólo la configuración LL5/2 estaríapresente en dHDL generadas espontáneamente. Como hemos propuestoanteriormente, los pares de hélices centrales 3-4 formarían un ramilleteintermolecular que se inserta en membranas que es posible en laconfiguración LL5/2, pero no en la 5/5.