Dominios involucrados en la interacción entre proteínas que unen ácidos grasos (FABPs) y membranas fosfolipidicas.

FALOMIR LOCKHART, LISANDRO J.; FRANCHINI, GISELA R; CÓRSICO, BETINA

Mar del Plata, Argentina

Congreso; Congreso Conjunto Sociedades Biomédicas SAB-SAIC-SAI-SAFE-SAP; 2004

SAB-SAIC-SAI-SAFE-SAP

Las proteínas que unen ácidos grasos (FABPs) son proteínas citosólicas de bajo peso molecular (14-15 kD) involucradas en el transporte de ácidos grasos (FA). En enterocito se coexpresan FABP de intestino (IFABP) e hígado (LFABP). La razón por la cual un mismo tipo celular presenta dos tipos de FABPs aún no es conocida. Previamente hemos demostrado diferencias en la cinética de transferencia de FA desde estas proteínas hacia membranas. Con el objetivo de profundizar el análisis de las diferencias entre estas dos proteínas, en éste trabajo hemos analizado la interacción de I- y LFABP con membranas. Asimismo, empleando una serie de variantes estructurales (mutantes puntuales de lisinas de la región alfa-helicoidal, proteínas quiméricas I-/LFABP y una variante de IFABP carente de la región alfa-helicoidal (IFABP-HL)), hemos caracterizado dicha interacción. Se emplearon vesículas que poseen el reactivo fotoactivable (125I-TID-PC) en su composición. Las proteínas fueron incubadas con vesículas de diferente composición, fotoactivadas, sometidas a SDS-PAGE y autorradiografía . Hemos observado que la interacción de IFABP con vesículas es modulada por la carga de las membranas aceptoras y la presencia del ligando, y que la región alfa-helicoidal juega un rol fundamental en dicha interacción. Las mutaciones individuales parecen no afectar significativamente la interacción de IFABP con membranas. Por otra parte ambas proteínas quiméricas mostraron una menor interacción con respecto a sus proteínas nativas, demostrando que la región alfa I es de gran importancia para la interacción de IFABP. Los resultados obtenidos demuestran que las interacciones electrostáticas participan en la interacción física de IFABP con membranas; y que la región alfa-helicoidal, en particular el segmento alfa-I, juega un papel fundamental en dicha interacción.