Errores congénitos del metabolismo en niños. Implementación de técnicas para su diagnóstico oportuno y preciso

SAAVEDRA, DAMIAN D; CLARISA E. ALVAREZ; GALVÁN, VIRGINIA; WIGGENHAUSER, JULIETA; HOURCADE, MONICA E; MÜLLER, GABRIELA L.

Congreso; Sociedad de biología de Rosario; 2019

Según se describe en la literatura, 1 de cada 1000 bebés nace con errores congénitos del metabolismo. Los aminoácidos en plasma y ácidos orgánicos urinarios son productos finales del metabolismo de las proteínas y de la degradación oxidativa de los componentes de la ingesta. Las deficiencias enzimáticas del metabolismo producen una acumulación anormal de los mismos, generando desórdenes que derivan en una importante disminución de la calidad de vida de los pacientes afectados, pudiendo llegar incluso a su muerte. El diagnóstico temprano de desórdenes congénitos en la infancia es clave para implementar un tratamiento adecuado que disminuya morbilidad (secuelas severas) y evite mortalidad. Teniendo en cuenta que las concentraciones de los ácidos orgánicos urinarios dependen de la alimentación, de la edad y de la genética de una población, el objetivo de este trabajo es la puesta a punto de las metodologías empleadas para el análisis de ácidos orgánicos en orina y la determinación de los valores de referencia de los mismos en nuestra región. En primer lugar se establecieron los métodos de extracción y derivatización de ácidos orgánicos en orina y su posterior determinación por GC-MS. Se analizaron 30 ácidos orgánicos elegidos debido a que son utilizados como indicadores de enfermedades congénitas. Los resultados obtenidos fueron reproducibles, obteniéndose desvíos estándares dentro de los valores aceptables para la técnica (menores al 20%), tanto cuando se analizan réplicas de cada muestra, como cuando se analizan los valores esperados al agregar diferentes compuestos estándares. Además, se realizaron curvas de calibración con soluciones de estándares de 22 ácidos orgánicos para determinar la linealidad y poder calcular concentraciones de los mismos en la orina. A fin de establecer los rangos de referencia para cada ácido orgánico, se analizaron más de 100 muestras de pacientes pediátricos sin síntomas de enfermedad metabólica (niñas y niños de hasta 13 años de edad, de Rosario y zonas cercanas). Los valores de cada ácido orgánico analizado fueron cuantificados en mmol/mg de creatinina o en unidades arbitrarias (UA)/mg de creatinina (UA: área de ión cuantificador/área de ión Estándar Interno). También se hicieron determinaciones en más de 50 muestras de pacientes con sospecha de enfermedad metabólica, los cuales fueron analizados en paralelo en laboratorios de referencia. Los resultados obtenidos en este trabajo confirmaron la metodología ya que fueron similares a los informados por dicho laboratorio. Sin embargo, el análisis de los resultados mediante comparación con los rangos de referencias encontrados en nuestra investigación permitió esclarecer y discriminar con mayor certeza y rapidez la enfermedad metabólica en cuestión o poder descartarla. El avance más significativo de este proyecto reside en la forma de análisis de resultados, que tiene en cuenta los rangos de referencia de nuestra población, datos carentes hasta el momento de nuestra investigación.