Desarrollo de una plataforma biomimética para el estudio de la captación de glóbulos rojos infectados con Plasmodium Falciparum en el bazo

SOUZA, EMILIA; SAFFIOTI, NICOLÁS ANDRÉS; ALVAREZ, CORA; SCHWARZBAUM, PABLO; PALLAROLA, DIEGO

Buenos Aires

Congreso; XXXIII Reunión Anual SAP 2022; 2022

Plasmodium falciparum es uno de los agentes etiológicos de la malaria, y realiza parte de su ciclo de vida dentro de los glóbulos rojos humanos (GRs). Los GRs infectados por el parásito (GRi) son capturados en la pulpa roja del bazo donde los vasos sanguíneos poseen pequeñas fenestraciones que retienen a los GRs poco deformables. El mecanismo por el cual los GRi son captados en el bazo no se ha comprendido totalmente. Por este motivo implementamos una estrategia biomimética utilizando un chip de microfluídica que imita las características de la circulación del bazo [1] y que permite estudiar la retención mecánica de GRi con un alto grado de control sobre las variables experimentales.Se fabricó un chip de microfluídica en polidimetilsiloxano que poseía canales de 5 micrómetros de altura y pequeñas angosturas de 5, 4, 3 y 2 micrómetros que imitan las fenestraciones del bazo. Los GRs se tiñeron con el colorante fluorescente BCECF-AM y se inyectaron en el chip a un hematocrito de 0.05%. El número de células retenidas en el chip se determinó por microscopía de epifluorescencia. Se estudió el efecto de un tratamiento térmico que disminuye la deformabilidad de los GRs (incubación a 45 °C durante 20 minutos) y el efecto de la infección con P.falciparum sobre la retención en el chip. Nuestros resultados indicaron que el tratamiento térmico aumentó el número de GRs retenidas en angosturas de 3 micrómetros de ancho (9.13 ± 2.7 contra 4.13 ± 1.14 GR por chip). Por otro lado, experimentos preliminares con GRi infectados con P. falciparum en estadío de trofozoíto poseen al menos 4 veces más chances de ser retenidas en las angosturas que los GR no infectados. Nuestros resultados sugieren que el uso de chips de microfluídica permite reproducir la retención de GRi observada in vivo. Futuros experimentos explorarán cómo el estadio madurativo del parásito en el GRi influencia su retención en el sistema biomimético.