Activación y regulación de la capacidad fecundante de espermatozoides mediante cascadas de fosforilación y desfosforilación en anuros (B. arenarum)

MAIDAGAN, PM; O´BRIEN ED; MORALES ES; KRAPF D Y ARRANZ SE

Casilda

Congreso; XIV Congreso y XXXII Reunión anual de la sociedad de biología de Rosario; 2012

Sociedad de Biología de Rosario

ACTIVACIÓN Y REGULACIÓN DE LA CAPACIDAD FECUNDANTE DE ESPERMATOZOIDES MEDIANTE CASCADAS DE FOSFORILACIÓN Y DESFOSFORILACIÓN EN ANUROS (Bufo arenarum) Maidagán, Paula María; O?Brien, Emma Dinora; Morales, Enrique Salvador; Krapf, Darío; Arranz, Silvia Eda 1Area Biología, Departamento de Ciencias Biológicas, Facultad de Ciencias Bioquímicas y Farmacéuticas, Universidad Nacional de Rosario. Instituto de Biología Celular y Molecular de Rosario, CONICET. e-mail: paulamaidagan@hotmail.com El espermatozoide de Anfibios Anuros, inmóvil en medios isotónicos, adquiere motilidad flagelar ante el estrés hipotónico. Como en la mayoría de las células animales altamente permeables al agua, el shock hipo-osmótico produce un hinchamiento del espermatozoide. Cambios de volumen celular se han visto involucrados en distintas vías de señalización, tanto metabólicas como de excitación,contracción, crecimiento, proliferación y apoptosis. La disminución de volumen celular mediado por activación de canales iónicos es una respuesta al estrés hipo- osmótico en distintas células. Nuestras evidencias recientes apuntan al rol de proteínas G en la activación de la motilidad flagelar ante el estrés hipotónico. La presente hipótesis de inducción de motilidad de espermatozoides plantea un rol activo de proteínas G como mediadora de efecto, activando luego mensajeros secundarios como AMPc, IP3 y Ca2+ que desencadenan la actividad de kinasas y fosfatasas. Utilizando anticuerpos específicos contra la proteína Gas, su presencia fue detectada en espermatozoides de Bufo arenarum mediante análisis de Western Blot. Sumado a esto, la incubación de espermatozoides con análogos permeables de adenosín monofosfato-3',5' cíclico, o con forskolina (db-cAMP, activador de la adenilato ciclasa transmembrana) promueven tanto la activación de Proteína Quinasa A (PKA) (analizado mediante inmuno detección en membrana de nitrocelulosa utilizando anticuerpos anti-sustratos fosforilados de PKA (CellSignaling #9621)), como la motilidad del espermatozoide, aún en medios isotónicos (7.2 ± 2 % de motilidad en controles; 78.3% de motilidad en 1 mM db-cAMP , n=5; p