Estudio de la expresión de la proteína transportadora de ácos grasos intestinal I-FABP en embriones de pez cebra

SCIARA A.A.; ARRANZ S.E.

Carlos Paz, Argentina

Congreso; XXXVIII Reunión anual de la Sociedad Argentina de Investigación Bioquímica y Biología Molecular; 2003

Sociedad Argentina de Investigación Bioquímica y Biología Molecular

Durante la transición de la blástula media en el desarrollo del embrión de pez cebra (Danio rerio) se forma la capa sincicial vitelina (CSV) por el colapso de los blastomeros marginales sobre la célula vitelina que hasta ese momento era anucleada. Se ha propuesto que la CSV tendría la función de nutrir el embrión absorbiendo los nutrientes contenidos en el vitelo. La célula vitelina podría también funcionar como fuente de señales inductoras para la formación del endodermo. Se ha descrito que al iniciarse la epibolia los núcleos sinciciales marginales cercanos a la región dorsal son los primeros en expresar el marcador endodérmico fkd2, haciéndolo luego las células localizadas en la región marginal más próxima a la CSV. La búsqueda de mensajeros de FABPs en bibliotecas de ADNc de  embriones y adultos de pez cebra determinó la presencia de un solo tipo de ARNm con homología  FABP de intestino (I-FABP) y de FABPs de corazón, cerebro e hígado, la mayoría de las cuales están presentes en blibliotecas de ADNc en estadío de 14 somitos. En nuestro trabajo la expresión de la proteína verde fluorescente (GFP) en pez cebra transgénico es dirigida por 1,2 Kpb pertenecientes al promotor de la proteína transportadora de ácidos grasos intestinal de rata. Esta construcción ha sido utilizada con éxito para dirigir la expresión de GFP de manera específica en el intestino de Xenopus y ratón mostrando una elevada conservación de los factores que activan al promotor. El comienzo de la expresión en pez cebra coincide con el estadío de 10 somitos (13 horas post fecundación) distinguiéndose fluorescencia en la célula vitelina exclusivamente. En el embrión de 24 a 72 hpf toda la zona vitelina sincicial muestra una fluorescencia muy intensa. Esta expresión coincide con la etapa en la que el vitelo es absorbido para alimentar al embrión. En el quinto día, cuando el vitelo ha desaparecido, la fluorescencia se localiza en la región del estómago y del intestino anterior. Los resultados muestran que la CSV expresa un marcador de diferenciación, como es la proteína de unión a ácidos grasos intestinal, que estaría involucrado directamente en la nutrición del embrión. En estadíos previos a la reabsorción total del vitelo (120 horas pos fecundación) no se puede discernir si la expresión es exclusiva de la célula vitelina ya que el intestino está rodeado por el vitelo. Es posible suponer que GFP se expresa en ambos ya que una vez reabsorbido el vitelo se observa expresión en estómago e intestino. La expresión de un marcador de diferenciación intestinal en la capa sincicial vitelina sugiere que la misma podría formar parte del endodermo del embrión.