Evaluación del potencial fotodinámico antimicrobiano de bioconjugados de proteínas y Rosa de Bengala

BORSARELLI, CLAUDIO D.; DORADO, RITA D.; ESPECHE TURBAY, M. BEATRIZ

Congreso; V Reunión GRAFOB 2020; 2020

La presencia de infecciones por bacterias resistentes a terapias convencionales como los antibióticos, hagenerado un desarrollo de técnicas antibacterianas que ejercen un efecto multitarget. La terapiafotodinámica antimicrobiana (TFDa) es una estrategia alternativa donde el principio básico es generar unafotosensibilización química mediada por especies reactivas del oxígeno (EROs), principalmente el oxígenosingulete (1O2) sobre un blanco diana (biomoléculas accesibles como ácidos nucleicos, proteínas, lípidos,componentes de membrana, entre otros). Para que esto ocurra es necesario poseer la combinación de unfotosensibilizador (FS), luz y oxígeno.Estudios llevados a cabo por nuestro grupo han demostrado que la asociación del FS Rosa de Bengala (RB)con la albúmina sérica bovina (BSA) modifican las propiedades fotofísicas y fotoquímicas del FS[1]. En basea esto el objetivo del presente trabajo, fue la evaluación del aducto RB/BSA como un recurso potencial paraaplicarlo a TFDa.Para evaluar el efecto fotodinámico antimicrobiano (aEFD) de los aductos se empleó una fuente deirradiación LED (luz blanca, potencia 1532 mW/cm2) a la cual se le acopló un filtro amarillo, con el fin deexcitar eficientemente a la especie RB (λexc=500-700 nm). Se empleó la menor relación del aducto con elfin de evitar el efecto scavanger de la proteína[2] (aducto 1:1 con [10μM] de FS y BSA), y se evaluó aEFD deeste bioconjugado sobre una cepa modelo de grampositiva como Staphylococcus aureus (St.aureus). Eltiempo de irradiación fue de 20min, y posteriormente se incubó la cepa a 37°C, y se monitoreo elcrecimiento a través del recuento de unidades formadoras de colonias (UFC) hasta 24 horas postirradiación.El mismo protocolo fue empleado para los controles con irradiación ([RB]=10μM; [BSA]=10μM;St. aureus sin el aducto), y para los controles a oscuras.Los resultados obtenidos demuestran un aEFD por parte de los bioconjugados de BSA/RB sobre St. aureus,reduciendo el crecimiento en dos unidades logarítmicas. Estudios posteriores resultan necesarios paraasociar el daño a nivel celular, y correlacionar el mismo a una localización del aducto dentro o fuera delmicroorganismo.Bibliografía[1] María Beatriz Espeche Turbay et al., J. Photochem. Photobiol. B Biol., vol. 141, pp. 275-282, 2014.[2] H. Kawasaki, et al., J. Colloid Interface Sci., vol. 510, pp. 221-227, 2017.