Rol clave de macrófagos hepáticos en el efecto regenerativo de las células madre mesenquimales sobre-expresando IGF-I como herramienta terapéutica para la fibrosis hepática.

MALVICINI M; GOMEZ BUSTILLO S; MAZZOLINI G; FIORE EJ; ATORRASAGASTI C; GARCIA M; BAYO J; RODRIGUEZ M; AQUINO J

Buenos Aires Argentina

Congreso; XIX Congreso Argentino de Hepatología.; 2017

AAEEH

INTRODUCCIÓN: Los macrófagos hepáticos (hMø) cumplen un rol importante tanto en la fibrogénesis como en la reversión de la fibrosis hepática. Anteriormente demostramos que el uso de células madre mesenquimales sobre-expresando el factor de crecimiento símil insulina-1 mediante un adenovirus (AdIGF-I-MSC) reduce la fibrosis hepática inhibiendo la activación de las células estrelladas hepáticas (CHE) y estimulando la regeneración hepatocitaria.OBJETIVO: Evaluar el efecto de AdIGF-I-MSC sobre el perfil funcional de los hMø durante la resolución de la fibrosis hepática.M&M: MSC de médula ósea de ratones BalbC fueron infectadas con AdIGF-1-MSC o un adenovirus control que expresa GFP (Green Fluorescent Protein; AdGFP-MSC). Para inducir fibrosis hepática en ratones se administró tioacetamida (TAA) durante 6-8 semanas (3 dosis/semana, 200 mg/Kg/dosis). A semana 6 se administró, por vía intravenosa, AdIGF-I-MSC, AdGFP-MSC o solución salina y al día siguiente se analizó la presencia hMø mediante inmunohistoquímica para F4/80 o se aislaron los hMø para evaluar la expresión de diversos factores por qPCR y ELISA. In vitro, se evaluó el efecto del medio condicionado (MC) de las MSC (vs DMEM) sobre hMø aislados sin tratamiento previo. También se evaluó el efecto de los hMø pre-tratados in vitro sobre CEH. Finalmente, se estudió el efecto terapéutico 2 semanas después de la administración de AdIGF-I-MSC deplecionando los hMø mediante clodronato el día previo al tratamiento.RESULTADOS: Al día posterior a la administración de las AdIGF-I-MSC se observó un aumento de la presencia de macrófagos en el hígado. Asimismo, los hMø aislados a este tiempo luego del tratamiento mostraron niveles de expresión de factores proinflamatorios/profibróticos reducidos (iNOS, TGF-b1, TNF-a, IL1b, IL6 e IL12) y anti inflamatorios/proregenerativos aumentados (Arginasa-1, IL10, IGF-I y HGF). Un afecto similar se observó luego del tratamiento in vitro de hMø con el MC de las AdIGF-I-MSC. Además, se redujo el estado de activación de las CEH luego de ser incubadas con el sobrenadante de cultivo de hMø pre-tratados con el MC de AdIGF-I-MSC. Finalmente, la depleción de hMø previa al tratamiento anuló significativamente el efecto antifibrótico y proregenerativo de las AdIGF-I-MSC.CONCLUSIÓN: La modulación del perfil funcional de los hMø hacia un perfil de tipo antifibrótico/prorregenerativo es un mecanismo clave para la reducción de la fibrosis hepática asociada al tratamiento con las AdIGF-I-MSC.