ESTANDARIZACIÓN DE MARCADORES SSRS PARA LA EVALUACIÓN DE LOS PATRONES DE DIVERSIDAD GENÉTICA DEL MEJILLÓN DE LA COSTA CHUBUTENSE

POSNER, VICTORIA; MÁRQUEZ, FEDERICO; ADAGLIO, SOL; TRIVELLINI, MARÍA MAGDALENA; VILLANOVA, GABRIELA; CARABAJAL, SOFÍA; VAN DER MOLEN, SILVINA

Rosario

Congreso; XXI Congreso y XXXIX Reunión Anual de la Sociedad de Biología de Rosario; 2019

Sociedad de Biología de Rosario

La miticultura está en desarrollo en Argentina y ocupa el tercer lugar de producción acuícola en el país. El desarrollo de métodos analíticos para la autenticación de las especies y el estudio de la diversidad poblacional, son necesarios para determinar las características del producto según su origen y validar su denominación a nivel de especie y variedad. El objetivo de este trabajo es estandarizar marcadores SSRs para estudiar la diversidad genética poblacional y analizar el nivel de estructuración genética dentro de cada sitio productivo. Se colectaron 308 muestras en sitios productivos y en bancos naturales de 3 zonas de producción de la provincia de Chubut. Se estandarizó la extracción de ADN a partir de tejido conservado en etanol 96% y se seleccionaron 16 marcadores microsatélites descritos en la bibliografía para diferentes especies del género Mytilus. Para la selección se consideraron la temperatura de anillado y el número de alelos. Se pusieron a punto las condiciones de amplificación por PCR para cada par de cebadores utilizando dos muestras de ADN. Catorce de los dieciséis loci amplificaron satisfactoriamente, obteniéndose un producto de amplificación. Luego los 14 marcadores se amplificaron en ADN proveniente de 24 individuos de una población de un banco natural. Los productos de amplificación se verificaron en geles de agarosa al 3%. Teniendo en cuenta el número de alelos para cada marcador, se seleccionaron 10 que presentaron mayor polimorfismo y fueron marcados fluorescentemente. Posteriormente utilizando los cebadores marcados se genotipificaron los individuos restantes utilizando electroforesis capilar con el secuenciador ABI3500. La asignación del tamaño de los fragmentos se realizó con el programa Gene Mapper y el estándar de peso molecular GeneLiz 600. Dos de los diez marcadores presentaron altos niveles de tartamudeo. Utilizando los ocho marcadores restantes se estimó el número de alelos por locus por población que varió entre 1 y 25. Solo un SSR resultó no polimórfico. Los valores de heterocigosidad esperada (He) variaron entre 0.258 y 0.945, y los de heterocigocidad observada (Ho) entre 0.071 y 0.821. se observó que todas las poblaciones de cultivo se alejaron del equilibrio de Hardy-Weinberg. En conclusión, se estandarizaron 7 SSRs informativos para el análisis de genética poblacional de Mitilidos presentes en el Mar Argentino.