Caracterización de una nueva isoforma del receptor de progesterona

GIULIANELLI, SEBASTIÁN; RIGGIO, MARINA; TOLEDO, MARIA FERNANDA; LANARI, CLAUDIA

Buenos Aires

Jornada; XXXIII Jornadas Multidisciplinarias del Instituto de Oncología Ángel H. Roffo 2018; 2018

INSTITUTO DE ONCOLOGÍA ÁNGEL H. ROFFO

Aproximadamente el 80% de los carcinomas mamarios que son receptor de estrógeno alfa (REα) positivos son también receptor de progesterona (RP) positivos. Nuestro laboratorio se ha focalizado en proponeral RP como blanco terapéutico ya que existe una interacción directa entre el RP y el REα. El RP existe como 2 isoformas principales codificadas a partir mismo gen: PRA y PRB. Hemos demostrado que carcinomasmamarios con mayor proporción de RPA que RPB, son susceptibles al tratamiento con antiprogestágenos, y, contrariamente, aquellos con mayor proporción de RPB que RPA son estimulados. Por ello, lacombinación adecuada de terapias para el tratamiento de cáncer de mama RE+/RP+ es paciente dependiente, debido a la expresión diferencial de sus distintas variantes. Por otra parte hemos demostrado que elestroma de los tumores es un proveedor del factor de crecimiento fibroblástico tipo 2 (FGF2) que se encuentra involucrado en la activación ligando independiente de los receptores hormonales. Por todo ello,estudiamos el interactoma del RE en células de cáncer de mama T47D (REα+/RP+) estimuladas con FGF2 y encontramos que isoformas nóveles de RP participan formando complejos con el RE, entre ellas laisoforma de splicing alternativo, RPB∆4, que carece el exón 4 de la isoforma RPB, por lo tanto no tiene la señal de localización nuclear y una parte del dominio de unión a ligando (LBD). El objetivo de este trabajofue transfectar células HEK293 y T47D-Y que no expresan RP en forma endógena con RPB o con la variante novel para caracterizar su peso molecular y su localización celular. Los estudios de Western Blotmuestran que la isoforma RPB∆4 tendría 100 kDa y es reconocida por distintos anticuerpos comerciales. Por otro lado, ensayos de inmunofluorescencia confirman que la localización de RPB∆4 en células T47D-Yy HEK 293 transfectadas es mayoritariamente citoplasmática, a diferencia del RPB que es nuclear, sin embargo luego del tratamiento con FGF2 se observó translocación nuclear sólo en células T47D-Y quetambién expresan RE. Los progestágenos no indujeron cambios en la localización celular. Dado que esta isoforma se activaría en forma ligando independiente sugerimos que podría tener una función de relevanteimportancia en la resistencia endócrina. Actualmente estamos investigando la expresión de RPB∆4 en muestras humanas de cáncer de mama con distinta proporción de isoformas RPA y RPB, ya que su expresiónpodría correlacionarse con un novel factor pronóstico.