Efecto del grado de sialización y complejidad de los oligosacáridos de FSH sobre la producción de inhibinas en células de la granulosa en cultivo

NAZARETH LORETI; LUZ ANDREONE; ROMINA TRIGO; VERÓNICA AMBAO; STELLA CAMPO

San Pablo, Brasil

Congreso; XXI Reunión de la Asociación Latinoamericana de Investigadores en Reproducción Humana, ALIRH; 2009

Justificativa: La producción de inhibinas A y B en células de la granulosa está diferencialmente regulada por FSH, activina A, E2 y factores del oocito. Objetivos:Evaluar el efecto de las diferencias en el grado de sialización y complejidad de los oligosacáridos presentes en la FSH (FSHrh) sobre la producción de inhibinas en células de granulosa (CG). Métodos: Mediante IEF se aislaron análogos de carga de FSHrh en un rango de pH 2.6-7.5. Se obtuvieron dos preparaciones combinando fracciones con pH 3-4 (acídica, AC) y 5-7 (básica, BA). Cromatografía en ConA fue utilizada para aislar isoformas con diferente grado de complejidad en sus oligosacáridos: complejos (NR y DR) y de tipo híbrido (FR). Cultivos de CG de ratas prepúberes tratadas con DES fueron estimulados con FSHrh entera o isoformas (0.5-16 ng/ml) por 72 hs. Se determinaron los niveles de inhibina A (inhA) y B (inhB) por ELISAs. Resultados: FSHrh estimuló predominantemente la producción de inhA en forma dosis-dependiente. Se observó una mayor sensibilidad de respuesta de la inhB frente a análogos de carga AC respecto de BA: 8.8±1.5 vs 1.5±0.2; en cambio la producción de inhA se vió favorecida por BA: 7.1±1.1 vs 2.0±0.3 (los resultados se expresan como veces de estímulo respecto del basal x±EEM). Las isoformas con oligosacaridos complejos, NR y DR, resultaron un estímulo más potente para la producción de inhB respecto de inhA (9.3±2.6 vs 3.5±0.3) en cambio las FR en el rango 0.5-2 ng/ml resultaron inhibitorias para la producción de inhB (0.5±0.1) estimulando ambos dímeros a la mayor dosis estudiada. Conclusiones: Estos resultados sugieren que diferencias en el grado de sialización y de complejidad de los oligosacáridos presentes en la FSH son factores adicionales que modulan diferencialmente la producción de inhibinas en CG en cultivo.