Efecto del tiempo de castración sobre el grado de sialización y complejidad de carbohidratos de FSH hipofisaria en LA rata macho

AMBAO V; CARINO M; CÓNSOLE G; RULLI S; CALANDRA R; CAMPO S

Mar del Plata, Buenos Aires

Congreso; LII Reunión Científica Anual de la Sociedad Argentina de Investigación Clínica; 2007

En trabajos previos hemos demostrado que durante el desarrollo sexual de la rata macho aumenta progresivamente el grado de sialización y la complejidad de las cadenas de carbohidratos (CC) de la FSH, las cuales confieren actividad biológica a la hormona. El objetivo del presente estudio fue determinar el efecto de la castración sobre el grado de sialización (determinado por la abundancia relativa de análogos de carga, expresión génica e inmunolocalización de sialiltransferasas ST6Gal-I y ST3Gal-III) y de complejidad de las CC. Se evaluaron 4 condiciones experimentales en hipófisis de ratas macho adultas (60-70 días): controles (C), y 2 (Cx2), 5 (Cx5) y 20 (Cx20) días post-castración. Se utilizó isoelectroenfoque preparativo, cromatografía en Concanavalina-A, RT-PCR semicuantitativa e inmunohistoquímica. La proporción de hormona más sializada (aislada a pH < 3.2) disminuyó significativamente luego de la castración: C: 14.8 ± 0.6%; Cx2: 3.6 ± 2.3%; Cx5: 6.5 ± 0.7% y Cx20: 3.7 ± 0.3% del total de hormona recuperada (p<0.01 C vs Cx), como así también la proporción de isoformas con CC altamente ramificados: C: 44.1 ± 6.2%; Cx2: 15.4 ± 4.7%; Cx5: 10.9 ± 2.1%; Cx20: 8.0 ± 3.7% (p<0.001 C vs Cx) y aumentó concomitantemente la proporción de isoformas con CC  de tipo híbrido: C: 25.4 ± 2.2%; Cx2: 45.5 ± 0.7%; Cx5: 53.9 ± 6.8%; Cx20: 56.7 ± 7.8% (p<0.01 C vs Cx). La expresión génica de ST6Gal-I disminuyó a los 2 días post-castración y luego aumentó progresivamente. La expresión génica de ST3Gal-III no presentó cambios. La intensidad de la inmunomarcación para ST6Gal-I;  el tamaño y la densidad celulares aumentaron en Cx5 y  Cx20 (p<0.05). No se observaron cambios en la inmunomarcación para  ST3Gal-III. La castración afecta principalmente el grado de complejidad de los CC de FSH y condiciona el posterior agregado de ácido siálico no permitiendo que la  sialiltransferasa específica controle el grado de sialización.