Evaluación de implantes de Titanio-Poliacrilato como sistemas de liberación de clorhexidina: biocompatibilidad in vitro sobre macrófagos murinos

CORTIZO M.C; OBERTI T.G.; CORTIZO M.S; FERNANDEZ LORENZO M; CORTIZO A.M.

San Luis

Simposio; XLII Reunión Anual de la Sociedad Argentina de Investigación Odontológica; 2009

Los implantes dentales de Titanio (Ti) son susceptibles a la contaminación por biopelículas bacterianas. Las películas de poliacrilatos de bencilo (PAB) conteniendo clorhexidina (CLH) han demostrado ser eficaces para reducir la adherencia microbiana, aunque se desconoce su biocompatibilidad. OBJETIVO: Evaluar la biocompatibilidad de Ti, Ti-PAB y Ti-PAB-CLH en un cultivo de macrófagos murinos. MATERIALES Y MÉTODOS: Se usaron muestras de Ti grado 1 y muestras Ti-PAB y Ti-PAB-CLH preparadas por casting de cloroformo. Se utilizó clorhexidina al 1,4 % p/p como agente antimicrobiano. Los implantes estériles se depositaron dentro de wells de 5cm2. Se plaquearon células monocitos/macrófagos de la línea Raw 264.7 y se cultivaron por 24h. Las células adheridas a los implantes (tinción naranja de acridina) se evaluaron por fluorescencia directa y las adheridas al well se tiñeron con Giemsa y se observó su número y morfología celular. RESULTADOS: la microscopia de epifluorescencia demostró que la cantidad de células adheridas sobre el control (Ti) y sobre el de Ti-PAB eran similares no observándose células muertas. Las células crecidas sobre el well mostraron resultados semejantes con preservación de la morfología normal. Los macrófagos sobrevivientes sobre la muestra PAB-CLH mostraron un número reducido (33,4% con respecto al control) con un importante número de células muertas por apoptosis/necrosis. Por otro lado, las células crecidas alrededor de este implante también mostraron una importante reducción en su número con significativas alteraciones morfológicas (pérdida de procesos conectivos, desaparición de citoplasma). El análisis estadístico (Tukey) de los resultados mostró que las muestras con Ti-PAB-CLH presentaron diferencias significativas con respecto a las de Ti y Ti-PCAB en el número de células adheridas. CONCLUSIONES: La utilización de la línea  celular Raw 264.7 demostró ser un método conveniente por su sensibilidad y reproducibilidad para evaluar la biocompatibilidad de los biomateriales utilizados. Las células adheridas a Ti y a Ti-PAB no mostraron signos de toxicidad a través de los ensayos realizados pero, la concentración de CLH utilizada para preparar las muestras Ti-PAB-CLH, afectó la adhesión de células las cuales revelaron signos de citotoxicidad.