Estudio de la estructura molecular del gen RHCE en individuos portadores del alelo RHD*D débil tipo 1

TRUCCO BOGGIONE C; MATTALONI S; BIONDI C; MUFARREGE N; ENSINCK A; COTORRUELO C; PRINCIPI C; LUJÁN BRAJOVICH M; GARCÍA BORRÁS S

Rosario

Congreso; XXI Congreso y XXXIX Reunión Anual de la Sociedad de Biología de Rosario; 2019

Sociedad de Biología de Rosario

La importancia del grupo sanguíneo Rh en medicina transfusional se debe a la participación de sus anticuerpos en los procesos de destrucción inmune de los glóbulos rojos. El sistema Rh es altamente polimórfico y es el más inmungénico después del grupo sanguíneo ABO. El locus RH está constituido por dos genes homólogos RHD y RHCE. Estos genes se encuentran dispuestos en tándem y segregan como haplotipos, por lo que algunos alelos RHD y RHCE muestran desequilibrio de ligamiento. Se han descripto más de 400 variantes alélicas que generan epitopes Rh parciales y/o débiles, fenotipos carentes de antígenos Rh de alta prevalencia y expresión de antígenos Rh de baja incidencia. Cuando estas variantes alélicas aberrantes se hallan en cis en pacientes que se encuentran bajo un programa de transfusión crónica, pueden ser responsables de la producción de aloanticuerpos complejos que conducen a reacciones hemolíticas transfusionales retardadas. El objetivo de este trabajo fue analizar la estructura molecular del alelo RHCE en individuos portadores de la variante alélica RHD*D débil tipo 1. Se estudiaron 20 muestras portadoras del alelo RHD*D débil tipo 1 con fenotipo Rh ccee previamente obtenidas de pacientes no relacionados provenientes de diferentes efectores de salud de nuestro país. Se investigó el fenotipo D por hemaglutinación con 4 reactivos monoclonales anti-D: IgM/IgG (clones TH28/MS26), IgM (clon MS201), IgM (clon RUM1) e IgM (clones LDM1+ESD1M). También se estudió el fenotipo Rh completo con anticuerpos anti-C (clon MS24), anti-c (clon MS33), anti-E (clon MS258/MS80) y anti-e (clones MS16+MS21+MS63). Se obtuvo ADN genómico a través del método de salting-out. Se utilizó una estrategia de PCR-RFLP para detectar los SNPs c.48C y c.48G en el gen RHCE. Los análisis serológicos realizados mostraron que todas las muestras presentaban una expresión débil del antígeno D y eran portadoras de los antígenos c y e (fenotipo Rh completo: Ddébil tipo 1ccee). La estrategia de PCR RFLP detectó a ambos polimorfismos estudiados en todas las muestras (n=20, 100%), resultando portadoras de un genotipo RHCE*ce(48C/G). Por otro lado, el SNP c.733G no fue detectado en ninguna de las muestras estudiadas. La variante alélica RHCE*ce(48C) fue hallada con una frecuencia del 100% en todas las muestras portadoras de la variante RHD*D débil tipo 1 analizadas, lo que sugiere que entre ambas existe un desequilibrio de ligamiento. Se realizarán nue