Evaluación de la inmunogenicidad de distintas formulaciones basadas en Transialidasas recombinantes para el desarrollo de una vacuna mucosal contra T. cruzi

FLORENCIA GONZÁLEZ; ESTEFANÍA PROCHETTO; VICTOR BLANCATO; GABRIEL CABRERA; ANA R. PÉREZ; CAMILA BULFONI BALBI; SILVINA VILLAR; CHRISTIAN MAGNI; IVÁN MARCIPAR; M. FLORENCIA PACINI; CECILIA FARRÉ; MARTIN ESPARIZ; IVAN BONTEMPI; OSCAR BOTTASSO

Workshop; Inmunología de la vacunación y adyuvantes; 2019

La Enfermedad de Chagas, causada por el parásito Trypanosoma cruzi, es un importante problema de Salud Pública en América Latina. Si bien existen drogas para su tratamiento, actualmente no existen vacunas profilácticas para combatir la enfermedad. Entre los antígenos vacunales más evaluados se encuentran la trans-sialidasa (TS). TS es uno de los factores de virulencia más importantes del parásito, y que utiliza para evadir el sistema inmune. En este trabajo nos propusimos evaluar la inmunogenicidad de dos Transialidasas recombinantes (TSr) diferentes en un modelo murino. Los fragmentos utilizados fueron seleccionados por bioinformática, abarcan distintas regiones de la TS y contienen distintos epitopes B y T, algunos de ellos inmunodominantes. Estos antígenos fueron posteriormente expresados utilizando dos sistemas bacterianos: Escherichia coli (TS-Nt) y Lactococcus lactis (TS-Ct). Una vez que los antígenos TS-Nt y TS-Ct fueron purificados, se utilizaron para inmunizar ratones hembras BALB/c (n=5/6) por vía intranasal (tres dosis, una cada dos semanas) con diferentes formulaciones que combinan estas TSr con diferentes adyuvantes (c-di-AMP o ISPA). Como grupos control se utilizaron ratones no inmunizados o sólo tratados con cada TSr, c-di-AMP o ISPA. Quince días luego de la última inmunización, se evaluó inmunidad mediada por células in vivo (Test de hipersensibilidad retardada-DHT) e inmunidad humoral específica (ELISA). Los resultados indicaron que los grupos vacunados, es decir TS-Nt ISPA, TS-Ct ISPA, TS-Nt c-di-AMP, TS-Ct c-di-AMP generaron una buena respuesta celular a las 24 y 48 hs, en comparación con los demás grupos control. Asimismo, los grupos inmunizados con las formulaciones vacunales mostraron aumentos en los niveles de Inmunoglobulinas específicas (IgA en heces y de IgG2a e IgG1 en plasma). Estos datos sugieren que en términos de inmunogenicidad, tanto la TS-Nt como la TS-Ct formuladas con ISPA o c-di-AMP y administradas por vía nasal serían buenos candidatos vacunales contra T. cruzi.