Expresión de los receptores glutamatérgicos en el borde proliferativo y las capas maduras de la retina de zebrafish.

LAMBERTI ML; VENERA G; FAILLACE MP

Buenos Aires

Congreso; Reunion Anual de la Sociedad Argentina de Fisiologia 2014; 2014

Sociedad Argentina de Fisiología (SAFIS)

#71: Expresión de los receptores glutamatérgicos en el borde proliferativoy las capas maduras de la retina de zebrafish.Lamberti, Melisa Luciana1; Venera, G2; Faillace, P1. Fac. Medicina, Departamentode Fisiología, UBA. IFIBIO-Houssay UBA-CONICET1. Instituto Italiano Universitariode Rosario2.El zebrafish (ZF) es un modelo experimental para estudiar procesosplásticos de crecimiento o regeneración de tejidos. La retina crece durantetoda la vida del ZF adicionando nuevas células desde una zonaciliar marginal (CMZ) formada por una población de stem cells y célulasprogenitoras. Las retinas utilizan glutamato como neurotransmisor enla vía directa de transmisión de información fótica. Esta vía incluye fotorreceptores,células bipolares y células ganglionares (CG). Los axonesde las CG portan información visual a las estructuras cerebrales. En lafase diurna, cuando el contenido de glutamato es más bajo, se observóla presencia de un pico de proliferación celular en la CMZ. Se describióque el glutamato inhibe la proliferación celular en la CMZ a través dereceptores glutamatérgicos AMPAR y/o Kainato. En ZF, existen 8 subunidadesdel AMPAR: GRIA1, GRIA2, GRIA3 y GRIA4 (con variantes A y B),que combinadas de a 4 forman un receptor funcional. Nuestro propósitofue analizar la expresión diferencial de genes en la CMZ y la región madurade la retina. Se realizó la puesta a punto de la separación del tejidodel borde (CMZ) y las capas maduras de la retina. Posteriormente, seanalizó la expresión de genes homeoboxes (Pax6A, Pax6B), factores detranscripción de stem cells (Lin28, Ascl1A) y CNG1, para determinar ungen que se exprese en la zona madura pero no en la CMZ. Se examinó laexpresión diferencial de las subunidades del AMPAR comparando bordecon región madura por RT-PCR y actualmente se analizan los nivelesrelativos de mRNAs entre la CMZ y la retina madura por RT-qPCR. Sedeterminó que el gen Lin28 sería expresado sólo por la retina madura.Todas las subunidades GRIA se expresan tanto en la CMZ como en laretina diferenciada. Mediante el análisis cuantitativo se determinará siexiste una expresión diferencial de las mismas. Los resultados indicaránel nivel de expresión de los diferentes tipos de AMPAR en una zona germinalindiferenciada o en una región diferenciada y funcional.