EL FÁRMACO ELIGLUSTAT COMO UNA ALTERNATIVA TERAPÉUTICA PARA PREVENIR LA ACCIÓN CITOTÓXICA DE LA TOXINA SHIGA TIPO 2

GOMEZ FERNANDO; IBARRA CRISTINA; BALESTRACCI ALEJANDRO; AMARAL MARÍA M; REPETTI, JULIETA; SACERDOTI FLAVIA

Buenos Aires

Simposio; PRIMER SIMPOSIO ARGENTINO DE ESCHERICHIA COLI PRODUCTOR DE TOXINA SHIGA RESPONSABLE DEL SÍNDROME URÉMICO HEMOLÍTICO; 2022

Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA), Facultad de Medicina-UBA, Asociación Argentina de Microbiología (AAM), Asociación Civil ?Lucha contra el Síndrome Urémico Hemolítico? (LuSUH).

En Argentina, el Síndrome Urémico Hemolítico asociado a infecciones por E. coli productora de toxina Shiga (Stx) es la principal causa de lesión renal aguda en la edad pediátrica. Stx2 se une al receptor globotriaosilceramida (Gb3) y daña las células endoteliales de la microvasculatura renal humana (HGEC). Dado que aún no existen terapias específicas para el SUH, los objetivos de este trabajo fueron: 1) Estudiar la acción de Eliglustat (EG), inhibidor de la síntesis del receptor Gb3, para prevenir la citotoxicidad de Stx2 en cultivos primarios de HGEC. Para ello, las HGEC se pre trataron con EG (0,5-25 μM) a distintos tiempos (2-48 hs). Se analizó: la viabilidad celular por incorporación de rojo neutro y el % de células necróticas y apoptóticas mediante marcación con Anexina-V/Ioduro de Propidio y citometría de flujo. También, las HGEC se pretrataron durante 30 minutos con tetraetilamonio (TEA: 100 μM), un inhibidor de la acuaporina 1, o durante 24 hs con EG (10 μM), posteriormente se incubaron por 40 minutos adicionales con Stx2 (50 ng/ml) en medio hipoosmótico (HYPO) o isosmótico (ISO). A continuación, se evaluó el volumen celular mediante microscopía óptica y por medición del área celular con el software Image J. 2) Analizar en un modelo in vivo la capacidad de EG para evitar los efectos de la intoxicación con Stx2. Para ello, se utilizaron ratones BALB/c al momento del destete (17-21 días) que fueron pretratados durante 3 días con una dosis diaria de EG (0,6 mg/g de peso corporal, por vía intraperitoneal (i.p.). Luego de 5 días, se inocularon por vía i.p. con una dosis subletal de Stx2 (0,1 ng/g) o con PBS. Se analizó: el peso corporal, la ingesta de comida y la histología renal por tinción de PAS. Los resultados indicaron que la máxima protección de la viabilidad de HGEC por EG se obtuvo con el pretratamiento de 24 hs y con 5 µM EG (EG 24 hs: 100,0 ± 2,6% vs Stx2: 49,0 ± 7,9%, n = 5, p