INVESTIGADORES
OLIVEIRA Rafael Gustavo
congresos y reuniones científicas
Título:
Utilización de herramientas fisico-quimicas para el estudio de capas de mielina
Autor/es:
PUSTERLA JULIO MARTÍN; RAFAEL GUSTAVO OLIVEIRA
Lugar:
Córdoba
Reunión:
Jornada; III Jornada de Jovenes Investigadores en Neurociencias de Córdoba; 2011
Resumen:
La
mielina es el material membranoso que cubre los axones y provee de rápida
conducción eléctrica. El presente proyecto plantea continuar con la
caracterización de capas (mono- o multi-moleculares) derivadas de mielina
purificada de fuentes naturales que se viene realizando en nuestro laboratorio
desde hace quince años. El proyecto a largo plazo es la determinación de un
diagrama de fases para sistemas derivados de mielina, en función de variables
externas, tanto manteniendo la composición lipo-proteica natural de la membrana
como alterándola químicamente. La variación de la temperatura tiene especial relevancia
a la hora de evaluar si los trabajos en que se aíslan supuestos dominios de
membranas que existirían fisiológicamente son confiables o serian
artefactuales. Técnicas actualmente en uso para aislar dominios de membrana involucran
el tratamiento en frío con detergentes. La pregunta crucial es si este
tratamiento (u otros) puede(n) modificar el estado físico de la mielina. Cuan
estable es la estructura de la membrana frente a variaciones internas y/o
externas? Se compararan resultados obtenidos para sistemas de monocapas en
interfase aire/agua, membranas en suspensión acuosa y sobre diferentes soportes.
Para las membranas de mielina (o sus lípidos purificados) se planea obtener difractogramas
de polvo de rayos-x a bajo ángulo (small angle x-ray scattering) en diferentes
condiciones ambientales. Dichas condiciones se refieren a la composición de
solutos no iónicos o iónicos, tanto monovalentes como bivalentes. Asimismo,
para cada condición se realizará un barrido térmico que comprenda desde el
rango fisiológico hasta al empleado en la obtención de dominios de membranas
por extracción con detergentes. Los difractogramas de SAXS permiten determinar (a
través de la separación de los picos de difracción correspondiente al
espaciamiento entre bicapas) si existe o no coexistencia de fases en respuesta
a la composición del entorno. Observaciones análogas se realizarán en monocapas
en interfase aire/agua utilizando microscopias de fluorescencia y de ángulo de
Brewster como así también de SAXS a ángulo rasante. Un objetivo colateral es
determinar hasta que punto monocapas y multicapas se comportan equivalentemente
en un sistema con proteínas intrínsecas de membranas.