Efecto de la vitrificación de ovocitos bovinos sobre la competencia de desarrollo embrionario

GADZE TOMAS; CETICA PABLO; GUTNISKY CYNTHIA

Buenos Aires

Jornada; V Jornadas Internacionales del Instituto de Investigación y Tecnología en Reproducción Animal (INITRA); 2017

Instituto de Investigación y Tecnología en Reproducción Animal- Facultad de Ciencias Veterinarias-UBA

La vitrificación de embriones bovinos por el método de mínimo volumen Cryotech® da resultados similares a los embriones frescos en cuanto a su viabilidad, calidad y tasa de preñez. Sin embargo se desconoce su efecto sobre los ovocitos bovinos. El objetivo del trabajo fue estudiar el efecto del proceso de vitrificación-atemperado por el método de Cryotech® de ovocitos bovinos sobre la competencia de desarrollo embrionario. Los complejos ovocito-cumulus (COCs) se obtuvieron por punción aspiración de ovarios provenientes de vacas de faena y se seleccionaron bajo lupa estereoscópica aquellos COCs con cumulus denso y compacto. Los mismos fueron madurados in vitro en medio 199 suplementado con suero fetal bovino (SFB), FSH + LH y gentamicina a 38°C y 5 % CO2 en aire humidificado. Finalizada la maduración un grupo de ovocitos fue denudado mecánicamente mientras que otro se mantuvo con el cumulus intacto. Los ovocitos fueron divididos en tres grupos: un grupo denudado vitrificado-atemperado (V), un grupo control denudado sin vitrificar (C) y un grupo control positivo sin denudar y sin vitrificar (C+). La fecundación in vitro (FIV) se realizó en medio mSOF, suplementado con heparina y albúmina bovina. El desarrollo embrionario se realizó en IVC-mSOF suplementado con SFB en atmósfera humidificada con 5% O2: 5% CO2 : 90% N2. El porcentaje de clivaje fue determinado mediante la evaluación del número de embriones que presentaron 2 o más blastómeras a las 48 horas luego de la FIV. La tasa de desarrollo embrionario fue determinado al día 7 posterior a la FIV estableciendo el porcentaje de blastocistos obtenidos. Los grupos mostraron diferencias significativas en las tasas de clivaje entre si (C+=78,60%; C=56,98%; V=27,40) (p<0,05). El desarrollo embrionario también mostró diferencias significativas entre los tres grupos (C+= 26,4%; C=9,8%; V=0%) (p<0,05). A partir de los resultados obtenidos se puede concluir que la vitrificación de ovocitos bovinos madurados in vitro por el método de Cryotech® afecta su calidad, disminuyendo la competencia de desarrollo embrionario. En el futuro se deberán ajustar los protocolos para poder adaptarlos a la gameta femenina de esta especie.